20007级预防医学卫生化学学问点
卫生化学:是应用分析化学(特殊是仪器分析)的根本原理和试验技术,探讨预防医学领域中与安康相关的化学物质的质、量及其变更规律的学科。
系统误差 ----误差的主要来源
指由分析过程中某些确定的、常常律:当一束平行的单色光通过含有吸光物质的稀溶液时,溶液的吸光度与吸光物质的浓度、液层厚度的乘积成正比。A = kcl
吸光度具有加和性 多组分混合体系中,假如各组分分子之间不存在离解、聚合、化学反响等化学平衡时,其吸光度具有加合性,即:
摩尔吸光系数:当c以mol/L为单位,l以cm 为单位,κ称为摩尔吸光系数,用 ε表示。A = aε l ε的单位为l/mol
ε表示物质的浓度为1mol/L,液层厚度为1cm时,溶液的吸光度
摩尔吸光系数的影响因素:1
2
3
例1 +溶液,用双环已酮草酰二腙分光光度法测定,于波长600nm处,=%,求吸光系数a和摩尔吸光系数ε。已知M(Cu)=
解 已知T=,则A=-lgT=,l=,
则根据朗伯—比尔定律 A=abc,
而ε= Ma = ·mol-1××102 L·g-1·cm-1=×104(L·mol-1·cm-1)
例2 某有色溶液,当用1cm比色皿时,其透光度为T,若改用2cm比色皿,则透光度应为多少?
解: 由A=-lgT=alc可得 T=10-alc
当l1=1cm时,T1=10-ac=T当l2=2cm时,T2=10-2ac=T2
偏离朗伯-比尔定律的因素
(一)仪器偏离 单色光
Lambert – Beer定律的前提条件之一是入射光为单色光。事实上难以获得真正意义上的纯单色光。分光光度计只能获得近乎单色的狭窄光一般带。复合光可导致对朗伯-比耳定律的正或负偏离。
(二)浓度的限制 稀溶液
Beer定律的假定:全部的吸光质点之间不发生互相作用;只有在稀溶液(C < 10-2mol/L)时才根本符合。当溶液浓度C>10-2 mol/L 时,吸光质点间可能发生缔合等互相作用,干脆影响了对光的汲取。
(三)化学偏离 恒定的化学环境
溶液中存在着离解、聚合、互变异构、协作物的形成等化学平衡时。使吸光质点的浓度发生变更,影响吸光度。
(四)非均相体系偏离 真溶液
光汲取定律的假定:溶液必需使均相体系。胶体、乳胶、悬浮物、沉淀等非均相体系产生的光散射会引起对朗伯-比耳定律的偏离。
物质的颜色是由于物质对不同波长的光具有选择性的汲取作用而产生的。物质的颜色由透过光的波长确定。例:硫酸铜溶液汲取白光中的黄色光而呈蓝色;高锰酸钾溶液因吸白光中的绿色光而呈紫色。
紫外可见分光光度计主要部件与作用
(一) 光源:在整个紫外光区或可见光谱区可以放射连续光谱,具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的运用寿命。
(二)单色器:作用:从连续光源中分别出所需波长的光束。主要部件:狭缝:出射狭缝和出射狭缝。色散元件:棱
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