啤酒发酵工艺流程.docx

实验一单细胞蛋白（SCR的生产
、实验目的
了解单细胞蛋白的开发优势及技术现状。
掌握单细胞蛋白的液体深层培养法及工艺控制规律。
了解发酵过程中菌体浓度及生物量的一般检测方法。
二、实验原理
所谓SCP（SingleCellPr00g（n=J——迎0—，，r为旋转轴到离心管中心距离），离心10分钟。将湿菌体放入已知重量的平■皿•或烧杯内，丁105oC烘干至包重，取出放入干燥器内冷却，再称重，即得菌体干重。由丁干燥后细胞具有吸湿性，可用自动天平■迅速称量。
五、实验结果及分析
（一）测定方法总糖和还原糖含量测定：蕙酮比色法氨基氮含量测定：甲醛氧化法发酵液中细胞量测定采用血球记数板记数生物量的统计采用细胞干重称量法
（二）分析
观察酵母细胞在整个发酵过程中，细胞增长规律及菌体形态变化情况。
六、注意事项
提前一周左右接斜面，斜面培养成熟后置冰箱保藏备用（4。C冰箱中保存）；提前一周左右，采购实验用相关材料，配制中间体检测用化学试剂。本实验预计学时数20学时。
实验二工程菌发酵生产色氨酸
一、实验目的
了解以细菌（大肠杆菌）为产生菌，获得初级代谢产物为目的的液体深层发酵方法。
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了解发酵液中色氨酸含量的检测方法。
二、实验原理
L一色氨酸化学名称为L-氨基呵噪基丙酸，分子式：G1H12NO，分子量：,它是含有呵噪基的中性芳香族氨基酸。
色氨酸的化学结构式
L-色氨酸是人体和动物生命活动中八种必需氨基酸之一，对人和动物的生长发育、新陈代谢起着重要的作用，被称为第二必需氨基酸，广泛应用丁医药、食品和饲料等方面
L-色氨酸的生产最早主要是依靠化学合成法和蛋白质水解法制造。随着色氨酸市场的开拓，微生物法生产色氨酸的方法现已走向实用并且处丁主导地位。微生物法大体上可以分为直接发酵法、微生物转化法和酶法。直接发酵法是以葡萄糖、甘蔗糖蜜等廉价原料为碳源，利用优良的色氨酸产生菌来生产色氨酸。由丁色氨酸合成的多重反馈抑制机制及弱化子调节机制，加上整个芳香族氨基酸代谢流在生物体内本来就较弱，使得该法在相当长的一段时间内达不到工业化生产的要求。随着重组DN破术在微生物育种中的应用，为优良的色氨酸生产菌株的筛选和产酸水平■的提高提供了可靠的技术保障，使微生物直接发酵法生产色氨酸成为一种廉价的工业化生产方法。微生物转化法是使用葡萄糖作为碳源，同时添加合成色氨酸所需的前体物（如邻氨基苯甲酸、呵噪、L-丝氨酸等），利用微生物的色氨酸合成酶系转化前体来合成色氨酸。酶法是利用微生物中色氨酸生物合成酶系的催化功能生产色氨酸。这些酶包括色氨酸酶、色氨酸合成酶、丝氨酸消旋酶等。酶法一般由酶源菌体的培养、菌体的分离洗涤、固定化和催化反应等几个阶段组成。酶法能够利用化工合成的前体物为原料，既充分发挥了有机合成技术的优势，乂具有产物浓度高、收率高、纯度高、副产物少、精制操作容易的优点，是一种成本较低的工业化生产色氨酸的方法。
氨基酸的直接发酵生产多以细菌发酵为主，本实验选用谷氨酸棒杆菌来发酵生产色氨酸。
三、实验仪器与材料
（一）仪器10L发酵罐、包温摇床、超净工作台、显微镜、数字可调移液器、高压灭菌锅、721分光光度计、电炉、包温培养箱、碱式滴