分光光度法测定茯苓中多糖的含量.docx

分光光度法测定茯苓中多糖的含量
 
 
（1武汉健民药业集团股份有限公司湖北武汉430052）
（2马应龙药业集团股份有限公司湖北武汉430064）
【摘要】目的建立茯苓中多糖的含量测定方法，分析不同产地和不同菌种培育茯苓r/min离心15min，取上清液。上清夜用10%冰醋酸溶液调pH值5～6，使其成糊状，离心，弃上清夜，残留物置透析袋中，用蒸馏水洗涤12h，离心得白色胶状沉淀，即为茯苓多糖。
，将其置200ml量瓶中，加水溶解至刻度，缓慢搅匀，，置10ml量瓶中，加水稀释至刻度，即得。
，精密称定，置棕色量瓶中，加水制成每1ml含200μg的溶液，作为贮备液，即得。
，加入5%，摇匀，，迅速摇匀，室温放置40min，在紫外-可见分光光度计490nm的波长处测定吸光度。
、80、120、160、200µg/，，以浓度（C）对吸光度（A）进行线性回归，得回归方程为A=+（r=），葡萄糖在40～200µg/ml范围内线性良好。
，，、、、、，RSD=%（n=5），表明仪器精密度良好。
，于0、1、2、4、8、24h，，、、、、、，RSD=%（n=6），表明供试品溶液在24h内稳定性良好。
，共5份，，、、、、，RSD=（n=5），表明本方法重现性良好。
，，精密称定，，，，%，%，表明本方法准确度良好。结果见表1。
表1加样回收率试验结果(n=6)
3讨论
-硫酸法、蒽酮-硫酸法、碘量法等测定含量，但由于蒽酮-硫酸法稳定性较差，线性关系不理想，重现性、稳定性所测数据差异较大，且蒽酮试液稳定性也较差，需临时配制，特别是加热后最大吸收峰偏移较大[3]；碘量法操作麻烦，且结果一般不够理想[4]，而苯酚-硫酸法是利用硫酸将多糖水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后和苯酚溶合成有色的化合物，即为橙黄色溶液，且颜色稳定，在适当波长处（490nm）有特征吸收，可测定多糖含量[5]，故笔者选用苯酚-硫酸法研究建立茯苓多糖的含量测定分析方法，结果表明该方法简便快速、准确可靠、重复性好。
，笔者分别将对照品和供试品溶液于紫外-可见分光光