生理指标.doc

植物抗盐性:植物的抗盐性涉及生理生化多方面的因素,是一种综合性状的表现。植物抗盐性指标是研究植物抗盐机理和抗盐能力的基础。光合作用、电导率、MDA含量、Na+和K+、ABA含量、保护酶活性对植物抗盐性有比较明确的指示意义
抗病害:病害逆境分、盐分等胁迫时体内的脯氨酸含量往往增加，它在一定程度上反映植物受环境水分和盐度胁迫的情况，以及植物对水分和盐分胁迫的忍耐及抵抗能力。
        植物体内脯氨酸的含量可用酸性茚三酮法测定。在酸性条件下，脯氨酸和茚三酮反应生成稳定的有色产物，该产物在 520nm 有一最大吸收峰，其色度与含量正相关，可用分光光度法测定。该反应具有较强的专一性，酸性和中性氨基酸不能与酸性茚三酮试剂形成有色产物，碱性氨基酸对这一反应有干扰，但加入人造沸石（ permutit ），在 PH 1~7 范围内振荡溶液可除去这些干扰的氨基酸（如甘氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、苯丙氨酸，精氨酸等 2 —氨基的氨基酸）。
[ 实验材料 ] 绿豆幼苗
[ 仪器设备 ] 分光光度计、水浴锅、天平、带塞试管、研钵、石英砂、漏斗、滤纸、玻棒、电导率仪、微波炉、移液管、试管、 50mL 小烧杯等
【试剂药品】
1 ．无离子水
2 ． 80% 乙醇。
3 ．酸性茚三酮试剂：称取 茚三酮，加入 60mL 冰醋酸和 40mL 6mol/L 磷酸，于 70 ℃ 加热溶解，冷却后储于棕色试剂瓶中， 4 ℃ 保存，两天内稳定。
4 ．脯氨酸标准母液：称取 10mg 脯氨酸溶于少量 80% 乙醇中，再用蒸馏水定容至 100mL, 成 100μg/L 母液。
5 ．人造沸石、活性碳等。
[ 实验步骤 ]
•  取绿豆种子，用水吸胀，萌动后加洗净的河沙覆盖，放在光照培养箱中培养（ 25 ℃ ，每天光照 12h ），当苗高 3~5cm 时，即可进行干旱 胁迫 处理。
•  一盆浇充足水分作为对照，另一盆干旱处理 24h 。
•  肉眼观察伤害症状。
•  取样和测定
测相对电导率：
每份取 2g （地上部分），剪成小段（ 左右），置小烧杯中，用去离子水洗三次，沥干，准确加入 20ml 去离子水，放置 1h, 摇匀 , 用 DDS -11A 电导率仪测得的电导率为 R 1 。将材料于微波炉中煮沸，彻底破坏材料的膜结构，冷却至室温后，测电导率 R 2 。
测脯氨酸含量：
1 ．脯氨酸标准曲线制作：吸取脯氨酸标准母液 0, , , , , , , 分别放入 8 个 50mL 容量瓶中，分别加入蒸馏水定容至 50mL ，配成 ， ， ， ， ， ， ， 的系列溶液。分别吸取上述各标准溶液 2mL ，冰醋酸 2mL ，茚三酮试剂 2mL ，加入到 10mL 带塞刻度试管中，塞上塞子，于沸水浴中加热 15 分钟，用分光光度计测定 520nm 的光密度值，以零浓度为空白对照。将测定结果以脯氨酸浓度为横坐标，以光密度值为纵坐标制作标准曲线。
2. 测定样品的脯氨酸含量
（ 1 ）提取脯氨酸：分别称取胚轴，每种处理各取三份，每份 。剪碎，加入适量 80% 乙醇，少量石