微生物学实验报告 - 图文.docx

微生物学实验报告 - 图文
微生物学试验报告
试验一 平凡光学显微镜的运用及细菌染色与形态视察
第一局部：显微镜的运用
一、目的要求
1．熟识平凡光学显微镜的构造、油镜的运用原理和显0 页








答：香柏油只在运用油镜头时〔101倍物镜〕运用，因为当镜与装片之间的介质为空气时，由于空气〔n= 〕的折射率不同，光线会发生折射，不仅使进入物镜的光线削减，降低了视野的照明度，而且会削减镜口角。当以香柏油〔n=〕为介质时，由于它的折射率与玻璃相近，光线经过载玻片后可干脆通过香柏油进入物镜而不发生折射，不仅增加了视野的照明度，更重要的是通过增加数值孔径到达提高辨别率的目的。。，它能区分两点之间的距离为 ；

油镜时，。
4、显微镜有哪几种？各自的主要特征是什么？
答：光学显微镜中除明视野显微镜外，还有暗视野显微镜、相差显微镜和荧光显微镜；除光学显微镜外，还有电子显微镜。
暗视野显微镜：在平凡光学显微镜载物台下安装一个暗视野聚光器即成暗视野显微镜。
相差显微镜：相差显微镜成像的原理和平凡光学显微镜一样，所不同的是相差显微镜包括有环状光阑、装有相板的相差物镜和全轴调整望远镜三个特别局部。
荧光显微镜：荧光显微镜的主要特征是以紫外线为光源，当照耀到用荧光素标记的细菌时，荧光素汲取了紫外线的能量后，再放射出可见的橙、黄、浅绿色荧光。由于用荧光素标记的菌体各种构造中的溶解、吸附或化合状况不一，于是发出不同色调和亮度的荧光，从而可以视察细菌的不同构造。










电子显微镜：电子显微镜的根本构造和工作原理与平凡光学显微镜特别相像，不同的是用电子流代替光线，用电磁圈代替透镜聚焦。
其次局部：细菌形态学检查方法
一、目的要求
1、 了解不染色标本检查法，用悬滴法视察活细菌及其动力。
2、 熟识染色标本的制备过程，驾驭革兰氏染色法及其结果判定，了解革兰氏染
色法原理。
3、 了解其它常用染色法。 二、试验原理
检查细菌形态的主要工具是显微镜，可依据不同目的将细菌染色或不染色进展镜检。常用的碱性染料有结晶紫、美蓝、碱性复红等。
染色法又分单染色法和复染色法两大类。单染色法即仅用一种染料着色，全部的细菌均被染成一种颜色，无鉴别细菌的作用。复染色法又称鉴别染色法，通常用二种或二种以上的染料着色，由于不同种类的细菌或同种细菌的不同组成构造对染料有不同的反响性而被染成不同的颜色，从而有鉴别细菌的作用。 2、 最常用的细菌复染色法是革兰氏染色法〔Gram stain〕。通过革兰氏染色法操作，可把细菌分成两大类：革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌。凡能使第一种染料结晶紫保存蓝色的细菌叫革兰氏阳性细菌，凡被洒精脱色后染上比照颜料沙黄或稀释复红而呈红色的细菌叫做革兰氏阴性细菌。 三、试验内容










〔一〕染色标本的制备及视察 1、复染色法〔革兰氏染色法〕
材料：葡萄球菌琼脂造就物 1支
大肠杆菌琼脂造就物 1支
革兰氏染液一套：结晶紫、95%酒精、路哥氏碘液、稀释复红各1瓶。玻片，接种环，酒精灯，吸水纸等。 方法：
〔1〕涂片 用葡萄球菌和大肠杆菌混合涂片。 ① 取玻片一块，拭净。
② 用无菌接种环取生理盐水一滴，放在玻片中心〔如被检材料是液体，可不加

生理盐水〕。
③ 左手斜持菌种试管，右手将菌种试管棉塞稍加转动，以便拔下。
④ 右手持接种环，经火焰灭菌后，用右手小拇指拔开菌种试管棉塞，试管口通过火焰，将接种环插入试管中取菌