益生元因可增加肠道益生菌的种群数量
益生元因可增加肠道益生菌的种群数量,并可有效改善机体安康状态而备受学者的关注。已有大量探究说明非消化性的低聚糖具有良好的益生元作用,且性质稳定、平安离心〔4000rpm,5min,4℃〕得菌泥,参加等体积的生理盐水〔%NaCl,3ml〕,充分混匀后,利用紫外-分光光度计于600nm测定OD值,记录不同菌株的生长状况,筛选出菌株生长趋势最为明显的菌株。
短链脂肪酸的测定依据Schneider等[59]的描述,利用气相色谱进展测定。分别用人参酸性多糖SDM造就基及人参中性多糖SDM造就基造就上述已筛选菌株,每株4ml按3%接菌量,37℃厌氧造就20h后,取2mL造就液至已灭菌的10mLEP管中,%的硫酸铜溶液杀死菌株。%的硫酸和2mL乙醚混匀,于摇床250r/min振荡摇匀45min,后离心〔3000r/min,5min〕,取上清液于另一无菌EP管中,参加无水氯化钙脱水,取上清液利用气相色谱测定甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、异戊酸及乳酸的质量浓度。
短链脂肪酸测定采纳外标法,用乙酸、丙酸、正丁酸、异戊酸和乳酸做标准曲线,检测器为氢火焰检测器〔FID〕;色谱条件为载气N2,分流比10:1,;用DB-FFAP色谱柱〔60米, mm〕;升温程序:120℃维持5min,以15℃/min 升到250℃保持1min,燃烧炉温280℃,待测样品体积为2uL。
依据张旭等的[31]描述方法,利用水提醇沉法从枯燥人参根中提取水溶性多糖,通过Sevag法除蛋白后,得到粗多糖,即为水溶性人参粗多糖,%〔W/W〕。收集得到的人参总多糖利用DEAE-纤维素离子交换层析住进展分别纯化,以蒸馏水为洗脱剂得到未吸附多糖局部,即中性多糖, NaCl为洗脱剂得到吸附多糖局部,即酸性多糖,% %。 “益生元”是一种不易被消化的食品成分,通过选择性刺激一种或少数种菌落
中的细菌活性与生长而对宿主产生有益的影响,最终改善宿主的安康状态[60]。 探究报道说明某些低聚糖具有益生元活性,如低聚果糖、低聚半乳糖、低聚木糖等[61-62] 。这些困难的碳水化合物在小肠内不被消化,在结肠可优先促进双歧杆菌和植物乳杆菌的生长。最为人们所熟知的即为菊糖和低聚果糖,可选择性的刺激双歧杆菌的生长[63-65]。因为对于益生元需求的日益增加,所以目前对于发觉新的具有潜在益生元活性的碳水化合物受到极大关注。进一步的探究重点主要是针对自然资源中所提取的多糖进展益生元活性的探究,如:挪威云杉、金莲花、平菇、杏鲍菇等自然资源中所提取的多糖。人参多糖作为人参中主要的活性成分,很多探究致力于人参多糖的提取,分别,纯化,构造分析及活性探究等,而对其益生元活性的探究报到甚少,本试验主要以人参中提取分别的中性多糖及酸性多糖为碳源造就并筛选生长状态良好的不同来源的植物乳杆菌菌株,同时检测了人参多糖对不同菌株短链脂肪酸产量的影响。
本探究对于人参多糖潜在益生元活性的评价是通过植物乳杆菌对多糖的利用,发酵过程中以其作为主要的碳源进展生长而测定。试验结果说明10株植物乳杆菌在不同的人参多糖中表现出不同的生长特性。这一结果与一些学者所报道的探究结果相相同[66]。益生菌对不同多糖的降解或发酵实力在不同种的植物乳杆菌或同一种群的不同株植物乳杆菌中具有较大差异[67]。另外,探究说明人参中性多糖的益生元活性要强于人参酸性多糖。导致这种结果的缘由可能是因为人参多糖的构造特征所导致,如:分子量,单糖组成,分子构象等都可能是影响多糖益生元活性的重要因素。
样品配制:分别称取中性人参多糖及酸性人参多糖以蒸馏水为溶剂配制浓度为0、、1、2、4m
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