透析袋使用方法.doc

透析袋的使用方法
透析袋的使用方法
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透析袋的使用方法
透析袋的使用方法
透析袋在使用前如何处理
透析已成为生物化学实验室最简便最常用的分离纯化技术之一。在生物大分子的制备过程中，除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子r7系列和生物技术级的透析袋基本不含硫化物和重金属离子。
使用时，一端用橡皮筋或线绳扎紧，也可以使用特制的透析袋夹夹紧，由另一端灌满水，用手指稍加压，检查不漏，方可装入待透析液，通常
要留三分之一至一半的空间，以防透析过程中，透析的小分子量较大时，
袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋涨破。含盐量很高的蛋白质溶液透
析过夜时，体积增加50％是正常的。为了加快透析速度，除多次更换
透析液外，还可使用磁子搅拌。透析的容器要大一些，可以使用大烧杯、
大量筒和塑料桶。小量体积溶液的透析，可在袋内放一截两头烧园的玻
璃棒或两端封口的玻璃管，以使透析袋沉入液面以下。
检查透析效果的方法是：用1％BaCl2检查(NH4)2SO4，用1％AgNO3检查NaCl、KCl等。
透析纳米颗粒带有机溶剂的，如何处理透析袋重复使用？先看是美国光
谱医学的还是美国联合碳化的透析袋？美国公司的方法都不一样的。大多数先用50％乙醇煮沸1小时，再依次用50％乙醇、/LEDTA溶液洗涤，最后用蒸馏水冲洗即可使用。实验证明，50％乙醇处理对除去具有紫外吸收的杂质特别有效。
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透析袋的使用方法
透析膜(前处理方法如下)：
，浸在蒸馏水中

15min

泡软。
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，并加热至80℃，一边搅
拌至少30min。
·EDTA中浸泡30min，以新鲜的EDTA同样
方法处理三次。
℃蒸馏水洗30min，然后换到20%酒精中，放在4℃冰
箱中保存。
透析是利用半透膜的选择性在溶液里分离大分子和小分子的一种分离
技术，常常用于除去蛋白或核酸样品中的盐、变性剂、还原剂之类的小
分子杂质，有时也用于置换样品缓冲液。
样品在膜的一边，缓冲液在另
一边，小分子即向两边扩散直到平衡透析是利用半透膜的选择性在溶液
里分离大分子和小分子的一种分离技术，
常常用于除去蛋白或核酸样品
中的盐、变性剂、还原剂之类的小分子杂质，有时也用于置换样品缓冲
液。样品在膜的一边，缓冲液在另一边，小分子即向两边扩散直到平衡
,
而大分子则由于半透膜的阻拦而留在一端，
通过不断更换缓冲液，即可
将样品中要除掉的小分子稀释到足够低的浓度。
该技术自五十年代发展
流行起来，主要使用半透膜制成的透析袋作为工具，
一直存在透析时间
长、样品回收率不高、无法处理微量样品的难题。如今
Pierce公司推
出三种不同的透析工具有效解决了部分问题.
这是专为10到100微升的微量样品透析而设计的。把样品加在平底
的透析管（类似小量提质粒的离心纯化柱
MiniSpin
，
毫
升的离心管中，管底是半透膜)中，再插入特制的浮板（浮漂）中，置
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于缓冲液面10分钟即完成透析。实验表明，。
如果在装缓冲液的烧杯底加磁力棒搅拌则更能加速透析速度。这种方法有较高的回收率，能够节约珍贵的样品，并能节约时间，特别适合摸条
件的预实验。根据半透膜的孔径和分子量截留值（分离范围）可分为3种规格：、7KMWCO和10KMWCO。
透析袋直径大约2cm，样品为大分子溶液，长度约10cm，请问一般多久需要换水，多少天可以除去小分子？
简单的做法是每过1天换水一次，总共换水4-5次。
专业点的做法是，把水置于下面，下面为蒸馏瓶，上面是冷凝管及透析袋，带一个连通器，上面的水满了就会自动跑到蒸馏瓶里，达到无限循环不断把小分子透析到底部蒸馏瓶中。
另外实验室里比较常见的做法是：利用反滴法分级沉淀，大分子会倾向于凝聚，而小分子一般不会析出，即使析出也会以小颗粒状分散于溶液，一般用反滴法得到的产物在氢核磁共振谱上是看不到小分子的吸收峰
的，纯度很高。
透析袋的使用方法
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透析袋的使用方法
为了提高透析效率，还可以使用各种透析装置。使用者也可以自行设计与制作各种简易的透