菌种筛选方法
菌种筛选方法
菌种筛选方法
菌种挑选方法
在实质工作中,为了提升挑选效率,常常将挑选工作分为初筛和复筛两步进行。初筛
的目的是删去明确不切合要求的大多数菌株, 把生产性状近似的菌株法常用于抗生素产生
菌的挑选, 工具菌常是抗生素敏感菌。
因为抗生素分泌处于微生物生长后期,
拿出琼脂块可
以防止各菌落所产生抗生素的互相扰乱。典型的例子是春雷霉素生产菌的挑选,见图。
3 摇瓶培育法 摇瓶培育法是将待测菌株的单菌落分别接种到三角瓶培育液中,
振荡培
养,而后, 再对培育液进行剖析测定。摇瓶与发酵罐的条件较为靠近,
所测得的数据就更有
实质意义。可是摇瓶培育法需要许多的劳力、设施和时间,所以,摇瓶培育法常用于复筛。
但若某些突变性状没法用简易的形态察看或平皿快速检测法等方法检测时,
摇瓶培育法也可
用于初筛。 初筛的摇瓶培育一般是一个菌株只做一次发酵测定,
从大批菌株中选出
10-20%
较好的菌株,裁减 80-90%
的菌株;而复筛中摇瓶培育一般是一个菌株培育
3 瓶,选出 3-5
个较好的菌株,再做进一步比较,选出最正确的菌株。
4 特别变异菌的挑选方法
上述一般的挑选菌株方法的办理量还是很大的,
为了从存活
的每毫升 106 左右细胞的菌悬液中挑选出几株高产菌株,要进行大批的稀释分别、摇瓶和
测定工作。 固然平皿快速检测法作为初筛手段可减少摇瓶和测定的工作量,
但稀释分别的工
作仍旧特别沉重。 并且有些高产变异的频次很低,
在几百个单细胞中其实不必定能挑选到,
所
以,成立特别的挑选方法是极其重要的。
比如营养缺点型和抗性突变菌株的挑选有它们的特
殊性,营养缺点型或抗性突变的性状就象一个高效分别的
"筛子 ",以它为挑选的条件,能够
大大加速挑选的进度并有效地防备漏筛。
在现代的育种中, 常存心以它们作为遗传标志选择
亲本或在 DNA 中设置含这些遗传标志的片段,使菌种挑选工作更具方向性和预示性。本节
还将简单介绍其余一些特别变异株的挑选方法。
营养缺点型突变株的挑选
经诱变办理后的菌悬液在挑选前一般应先进行诱变后培
养,以促进变异细胞发生疏别,
防备出现表型延缓现象,
挑选出不纯的菌株。营养缺点型的
挑选一般包含浓缩、进一步检出和鉴识营养缺点型等步骤。
1) 浓缩营养缺点型菌株
诱变后的细胞集体中大多数存活菌是野生型,而营养缺点型
占的比率相当小,这对分别是很不利的,
所以,应当裁减大批的野生型,以达到浓缩营养缺
陷型的目的。常用的浓缩方法有抗生素法、菌丝过滤法、差异杀菌法和饥饿法等。
2) 进一步检出所需缺点型
浓缩后的菌液中营养缺点型的比率较大,但并不是所有都是。
并且营养缺点型中也有不一样的种类,
还需要进一步检出所需要的营养缺点型。
这样就需要采
用逐一检出法、夹层培育法和限量补给法等方法进一步检出所需要的营养缺点型。
3) 营养缺点型的判定
获取的营养缺点型
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