HPLC法测定跌打丸中血竭素的含量方法改进.docx

HPLC法测定跌打丸中血竭素的含量方法改进
 
   
 
 
 
 
 
 
 
     
 
 
 
 
 
摘要：目的通过测定跌打丸中血竭素的含量，来确定出最佳的加流温度， 试剂
所用试剂为色谱纯或分析纯。
2 方法
色谱条件
色谱柱采用C18为填料，流动相为乙腈-，比例采用49:51；紫外检测选用440nm。理论板数按血竭素峰计算应不低于4000。
对照品溶液的制备
对照品：血竭素高氯酸盐
配制溶液：3%磷酸甲醇溶液
配制浓度：µg的溶液
供试品溶液的制备
取跌打丸大蜜丸样品，剪成小块，、，分别精密加入3%磷酸甲醇溶液25ml，塞上瓶盖，电子天平上称定重量，70℃加热回流30分钟，放冷至室温，再次称定重量，用3%磷酸甲醇溶液补足减失的重量，充分摇匀后，进行离心处理，，作为供试品溶液。
精密度试验
吸取配制好的对照品溶液20uL，采用全自动进样器连续进样5次，测得峰面积，结果RSD＝%，精密度测定符合标准规定。
线性关系的考察
将血竭素高氯酸盐对照品放至室温后，，置10mL棕色量瓶中，用吸管吸取3%磷酸甲醇溶液至量瓶中进行溶解，连溶解边振摇，并稀释至刻度。、、、、，转移至10mL棕色量瓶中，再加3%磷酸甲醇溶液，边加边振摇，加至刻度。分别吸取5个浓度的对照品溶液，注入液相色谱仪，如法测定。以对照品浓度的峰面积进行线性回归，得回归方程：Y＝+，r＝。
重复性试验
取跌打丸大蜜丸样品适量，，以6次的测定结果计算RSD，RSD＝%，重复性测定符合标准规定。
加样回收率试验
取跌打丸大蜜丸样品适量，精密称取供试品1g，共称取6份，再分别加入24ug/ml对照品溶液3ml、4ml、5ml置150ml磨口瓶中，，结果见表1，结果显示，本方法有良好的回收率
表1 回收率
样品序号
样品含量
加入对照品的量
实测值
回收率
RSD(%)
1



%
%
2



%
3



%
4



%
5



%
6



%
样品的测定
取4批样品，，同时再按2020版药典方法制得供试品溶液，依法测定，两者的对比结果见表2：
表2
样品序号
90℃以上含量
70℃含量
含量提高的百分率
1