HPLC高效液相色谱测定海尔福口服液中甘草酸含量.docx

HPLC高效液相色谱测定海尔福口服液中甘草酸含量
 
 
（右江民族医学院重金属与氟砷毒物研究实验室广西百色533000）
【摘要】目的采用高效液相色谱(HPLC)测定海尔福口服液中甘草酸含量,并与甘草药材提取液进行对比分析canbeusedforthequalitycontrolofHaierfuoralliquid.
【Keywords】HPLCHaierfuoralliquidGlycyrrhizicacid
一种预防和治疗氟铅汞砷中毒的药物及其生产方法（商品名:海尔福口服液,专利号:)是我校的专利项目,为复方中药制剂,含金银花,甘草,茯苓等中药,经水提取精制而成,具有清热解毒,促进重金属汞铅及氟砷等毒物排泄功能。有多种有效成分,甘草酸是其中之一。本实验采用高效液相色谱(HPLC)方法,研究测定其在产品中的含量,可作为质量控制的指标,现将实验方法和结果报道如下。
1仪器与色谱条件

DIONEXUltiMate3000型高效液相色谱仪（戴安中国有限公司，美国产），SRD-3X00在线脱气试剂架（选配）、XPG-3X00系列泵、7725i手动进样/WPS-3000系列自动进样、TCC-3X00系列柱温箱(选配)、检测器(VWD-3X00紫外检测器/PDA-3000二极管阵列检测器/RI/ELSD/RF等)等；DL-180B智能超声波清洗器（上海之信仪器有限公司）；分析天平(型号TG328B，器号49050，上海精科天平)。
[1]
固定相：色谱柱：Acclaim?120C185μm(×250mm)，柱温30℃[1][2]；流动相：甲醇：水：冰乙酸（71:28:1）[3][4]，测定前用超声波脱气10min，流速为1ml/min，检测：UV为250nm[5]，进样量20ul。
2试剂与实验药材
甲醇(色谱纯,天津市大茂化学试剂厂)；冰乙酸(色谱纯,天津市津科精细化工研究所)；水(三重蒸馏去离子水)；甘草酸二钾对照品(装量100mg，中国药品生物制品检定所，批号100551-200401)；海尔福口服液,由本院海尔福研制中心提供的样品,由金银花、甘草、茯苓等中药组成。甘草药材，购自本市药店；旧甘草药材，购自本市药店，本实验室(室温)已保存十年以上。
3试验方法[5]
，加甲醇至刻度,摇匀，，精密量取1ml至10ml容量瓶，加甲醇至刻度，。
[2]
[3]
精密称取甘草药材约2g，加75%乙醇水浴回流提取，30分钟，回流提取两次，合并提取液，浓缩，回收乙醇，浓缩液用乙醇溶解，用流动相稀释至10ml。，加甲醇至刻度，摇匀，，即得供试品。
[4]
精密称取甘草药材约2g，加水回流提取，40分钟，回流提取两次，合并提取液，浓缩，浓缩液用乙醇溶解，用流动相稀释至10ml。，加甲醇至刻度，摇匀，，即得供试品。甘草药材2水提液和旧甘草药材水提液依此法制备，得供试品。海尔福口服液,由本院海尔福研制中心提供的样品,由金银花、甘草、茯苓等中药组成,经水提取,醇沉,过滤,回收乙醇,定容,灌装密封,高压105℃,用上述方法稀释定容,，即得供试品。
4结果
,样品(供试品)溶液注入色谱仪,,理论塔板数2000以上;,理论塔板数2000以上。
(标准曲线绘制)
从储备液中取甘草酸二钾对照品溶液1ml、2ml、4ml、6ml,、8ml，分别加甲醇稀释至10ml（、、、、），摇匀，即得供试品，测定结果如下，见表1和图一：
,时间:
表1甘草酸二钾对照品测定结果（x-）
浓度(mg/ml)
峰高值(h)
峰面积(s)
方差分析：R=
结果表明,浓度(mg/ml)-,有良好的线性关系。

将配好的甘草酸二钾对