摘要:以鄂藕杂3号莲藕顶芽或侧芽的茎尖为外植体,接种于不同样激素配比的MS培养基上诱导胚性愈伤组织。成果表白,不同样浓度的激素组合对莲的胚性愈伤组织诱导有不同样的影响,最佳培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 5.0 mg/L。 核心词:莲;茎尖;诱导;胚性愈伤组织 中图分类号:Q813.1文献标记码:A文章编号:0439-811414-2991-02 Primary Study on Embryogenic Callus Induced from Shoot Tip of Nelumbo nucifera DIAO Ying1,WU Jin-ping2,ZHAO Ling-ling1,HU Zhong-li1 Abstract: The shoot tips of Nelumbo nucifera “E Ou Za 3” were cultured on medium; and embryogenic callus was induced. The result showed that the induction frequency was affected by the concentration of hormone combinations. The optimal induction medium was MS+ mg/L 6-BA+5 mg/L 2,4-D. Key words: Nelumbo nucifera; shoot tip; inducement; embryogenic callus 莲属睡莲科近年生草本植物,是中国重要的水生蔬菜。目前莲的种植仍多采用具有两节充足成熟藕身的子藕作藕种进行无性繁殖的措施,该繁殖措施需种量大,扩繁较慢且成本高。目前,已有多家研究机构报道了莲藕组培快繁研究[1-4],但是以上研究均是运用诱导丛生苗的措施进行,增殖系数仍然受到一定的限制。鉴于此,特进行了莲胚性愈伤组织诱导实验,为摸索迅速繁殖藕种的有效措施、减少藕种投入开辟新的途径,同步也为莲的基因工程育种打下基本。 1材料和措施 1.1材料 供试材料采自武汉大学莲藕研究中心基地,取鄂藕杂3号莲藕顶芽或侧芽。 1.2措施 1.2.1愈伤组织诱导用自来水将芽冲洗干净,然后用体积分数为75%的酒精进行表面消毒1 min,随后用1 g/L的HgCl2溶液灭菌8 min,不时摇动,灭菌完毕后用无菌水冲洗外植体3次。然后在无菌条件下剥取茎尖生长点,立即接种到固体培养基上,接种插入深度为外植体长度的1/3。诱导培养基以MS为基本培养基,分别添加6-苄基氨基嘌呤、2,4-二氯苯氧乙酸钠两种植物生长调节剂,其浓度和配比详见表1。蔗糖浓度30 g/L,结冷胶2.2 g/L,pH值5.8。避光培养。 1.2.2继代培养将诱导出的胚性愈伤组织转入继代培养基,继续培养增殖。继代培养基及培养