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第三章免疫分析主讲:周振华第一节免疫分析理论知识?免疫分析法:应用不同的标记物,以抗原抗体相互结合为基础的免疫学测定方法。酶免疫分析酶免疫分析发光免疫分析发光免疫分析放射免疫分析放射免疫分析免疫分析种类区别 1、用放射性元素作标记物,称为放射免疫分析法。 2、用酶作标记物,称为酶免疫分析法。 3、以化学发光物质作标记,称为化学发光免疫分析法。化学发光免疫的历史? 20 世纪 80 年代中期在酶免疫分析基础上出现。?定义:将化学发光或生物发光体系与免疫反应相结合,用于检测微量抗原或抗体的一种新型标记免疫测定技术。?化学发光免疫分析包括两部分: ?1、免疫反应系统?2、化学发光系统?免疫反应系统,其基本原理同酶联免疫技术( ELISA ),常采用双抗体夹心法、竞争法、间接法等反应模式。化学发光系统的原理?发光底物在酶的作用下,底物发生化学反应并释放出大量的能量, 产生激发态的中间体。这种激发态中间体,当其回到稳定的基态时,可同时发射出光子。?利用发光信号测量仪器即可测量光量子数量,该光量子数量与样品中的待测物质的量成正比。由此可以建立标准曲线并计算样品中待测物质的含量。光照发光:是指发光剂(荧光素)经短波长的入射光照射后,电子吸收能量跃迁到激发态, 在其回复至基态时,发射出较长波长的可见光(荧光)。生物发光:是指发生在生物体内的发光现象, 如萤火虫的发光,反应底物为萤火虫荧光素,在荧光素酶的催化下,利用 ATP 能,生成激发态氧化型荧光素,它在回复基态时多余的能量以光子的形式释放出来。化学发光:是指伴随化学反应过程所产生的光的发射现象。某些物质(发光剂)在化学反应时, 吸收了反应过程中所产生的化学能,使反应的产物分子或反应的中间态分子中的电子跃迁到激发态,当电子从激发态回复到基态时,以发射光子的形式释放出能量,这一现象称为化学发光。