基因工程:对不同生物的遗传物质一基因,在体外进行 剪切、组合和拼接,使遗传物质重新组合,然后通过载 体转入微生物、植物或动物细胞内,进行无性繁殖,并 便所需要的基因在细胞中表达,产生出人类所需要的产 物或组建成新的生物类型。
细胞工程:包测法可分为菌落印迹原位杂交、斑点印 迹杂交、southern印迹杂交和Nothern印迹杂交四类。 寡核昔酸探针:是人工合成且被适当标记的由短链核苷
酸组成的DNA或RNA分子。它能够与被检测的长链DNA 或RNA的一小部分互补结合,从而能够用于检测、鉴定 长链核苷酸
反转录PCR(RT-PCR)是指以mRNA在反转录酶作用下合 成cDNA第一链为模板进行的PCR。
反向PCR (reverse PCR)是用反向引物对某个已知DNA 片段两侧未知序列进行的PCR。
嵌套PCR(或称巢式PCR)是指先后用两套引物进行扩增 的 PCR。
复合PCR(或称多重PCR)在一个反应体系加入多对不同 的PCR引物同时扩增,获得多个PCR产物,这种PCR称 为复合PCR用于检测特定基因序列的存在或缺失。
不对称PCR是指用不等量的一对引物产生大量单链DNA。 通过特定设计的PCR仪器检测PCR扩增过程每一轮循环 产物标记的荧光信号累积数量,从而进行实时监测整个 PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析, 称为实时荧光定量PCR。
cDNA文库(cDNA library)含有全部蛋白质编码的结构 基因。是指将某种生物体某一发育时期所转录的全部 mRNA经反转录形成的cDNA片段与某种载体连接而形成 的克隆的集合。
基因组文库(genomic library)含有全部基因。
基因组文库(Genomic library)是指将某种生物体的全 部基因组DNA用限制性内切酶或机械力量切割成一定长 度范围的DNA片段,再与合适的载体在体外重组并转化 相应的宿主细胞获得的所有阳性菌落,这个群体就称为 该生物基因组文库。
转化:DNA重组分子在体外构建完成后,必须导入特 定的受体细胞,使之无性繁殖并高效表达外源基因或直 接改变其遗传性状,这个导入过程及操作统称为重组 DNA 分子的转化(Transformation)。
受体细胞(receptor cell):又称为宿主细胞(host cell),是指能摄取外源DNA并使其稳定维持的细胞 感受态(competence):是指细菌吸收外源DNA的 生理状态。
感受态细胞(competence cell):是指具有接受外
源DNA能力的细胞。
转化(transformation):指感受态的大肠杆菌细胞捕获 质粒DNA或以它为载体构建的重组质粒DNA分子的过 程。
转化子(transformant):经转化获得外源遗传物质的细 胞。
转染(transfection):指感受态的大肠杆菌细胞捕获噬 菌体或以它为载体构建的重组DNA分子的过程
转导(transduction):指病毒转移真核细胞DNA的过程 或噬菌体介导的细菌细胞之间基因转移的过程。
电转化又称电穿孔法(electroporation): 是指在细胞上施加短暂、高压的电流脉冲,在质膜上形 成纳米大小的微孔,DNA直接通过这些微孔或者作为微 孔闭合时所伴随发生的膜组分重新分布通过质膜进入 细
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