化妆品微生物指标检验.ppt

化妆品微生物检验
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化妆品因含有水分，油脂，蛋白质，多元醇等，为微生物的生长创造了良好的条件，造成产品变质。
为了抑制微生物的繁殖和消费者使用过程中的产品污染，往往在化妆品中加入防腐剂，但不能过量。
因此，化妆品保存一个月
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菌落总数检验
菌落总数（Aerobic bacterial count）是指化妆品检样经过处理，在一定条件下培养后（如培养基成分、培养温度、培养时间、pH 值、需氧性质等），1g（1mL）检样中所含菌落的总数。所得结果只包括一群本方法规定的条件下生长的嗜中温的需氧性菌落总数。
测定菌落总数便于判明样品被细菌污染的程度，是对样品进行卫生学总评价的综合依据。
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数据
处理
混合平板的制备
细菌的培养
检查结果、观察与计数
供试液
的制备
书写检验
记录单
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化妆品中防腐剂抑制细菌的生长.
含卵磷脂、吐温80 营养琼脂培养基进行中和。对尼泊金类、苯甲酸类、六氯酚类等有效，但对卡松类的防腐剂的中和效果有限。
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卡松的中和剂半胱氨酸,可较好的中和卡松的抑菌效果。因此,检测时不同的防腐剂加入不同的中和剂
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为便于区别化妆品中的颗粒与菌落，可在每 100mL 卵磷脂吐温 80 营养琼脂中加入 1mL ％的 TTC 溶液，如有细菌存在，培养后菌落呈红色，而化妆品的颗粒颜色无变化。
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在膏霜类化妆品中,微生物都是吸附或附着于颗粒状的原料中,检测时不易洗脱下来,因此,需要验证检测方法的有效性。
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粪大肠菌群
粪大肠菌群（Fecal coliforms）系一群需氧及兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌，在 ℃±℃培养 24h～48h 能发酵乳糖产酸并产气。
该菌直接来自粪便，是重要的卫生指示菌。
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产酸：黄色
产气：气泡
产酸产气
书写检验
记录单
不产酸不产气
增菌培养
供试液的制备
配培养基和稀释液
检查结果判断
44 ±℃
24~28h
分离培养
蛋白胨水培养
最终结果判断
44 ±℃
24±2h
靛基质
特征菌落
36±1 ℃
18~24h
双倍胆盐乳糖M
EMB琼脂
液面玫瑰红色
紫黑色
★粪大肠菌群检查流程图
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铜绿假单胞菌
铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）属于假单胞菌属，为革兰氏阴性杆菌，氧化酶阳性，能产生绿脓菌素。此外还能液化明胶，还原硝酸盐为亚硝酸盐，在 42℃±1℃条件下能生长。
该菌对人有致病力，可使伤处化脓，引起败血症等。
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最终结果判断
增菌培养
供试液的制备
书写检验
记录单
分离纯化
无菌落或无特征菌落
配培养基和稀释液
革兰染色、镜检→
氧化酶试验
绿脓菌素试验
生化试验 硝酸盐还原试验
42℃生长试验
明胶液化试验
★铜绿假单胞菌检查流程图
SCDLP培养基
十六烷三甲基溴化铵琼脂
36±1℃
18~24h
36±1℃
18~24h
特征菌落
灰白色、扁平、周围有水溶性蓝绿色素
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十六烷三甲基溴化铵平板
SCDLP培养基
黄绿色菌膜
灰白色湿润
氧化酶试验
粉红/紫红色
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绿脓菌素试验
盐酸层呈粉紫色氯仿层呈蓝绿色
硝酸盐还原产气试验
N2
明胶液化试验
明胶培养基（高层）
明胶液化
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金黄色葡萄球菌
金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）为革兰氏阳性球菌，呈葡萄状排列，无芽胞，无荚膜，能分解甘露醇，血浆凝固酶阳性。
该菌是葡萄球菌中对人类致病力最强的一种，能引起人体局部化脓性病灶，严重时可导致败血症。
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革兰染色、镜检→
生化试验:血浆凝固酶试验
甘露醇发酵试验
最终结果判断
增菌培养
供试品的处理
书写检验
记录单
分离纯化
无菌落或无特征菌落
配培养基和稀释液
36±1℃
36±1℃
%NaCl肉汤
24±2h
Baird Parker’s或血琼脂
24~48h
特征菌落
★金黄色葡萄球菌检查流程图
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Baird Parker’s平板
灰/黑色
甘露醇发酵试验
血浆凝固酶试验
血浆凝块
液态血浆