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一种测定微藻单藻落脂肪酸成分构成的方法
一种测定微藻单藻落脂肪酸成分构成的方法
本发明是一种测定微藻单藻落脂肪酸成分构成的方法。本发明解决了现有技术在微藻油脂成分分析过程使用的甲酯化方法需样量大、操作步骤多和耗时长的技术问题。本发明方法 点。
[0007] 为了实现上述目的，本发明采取的技术方案为：
[0008] 取一个微藻的单藻落或等量微藻样品（约0? 01_5mg)，加入1ml的饱和K0H-CH30H 溶液，对单藻落样品进行皂化和甲酯化，在充分混合震荡作用后，加入1ml正己烷，萃取得 到的脂肪酸甲酯，即可进行气相色谱分析。
[0009]具体步骤如下：
[0010] (1)脂肪酸的甲酯化：
[0011] 取一个微藻的单藻落或等量微藻样品（约0. 01_5mg)，将其加入1ml的饱和 K0H-CH30H溶液，超声清洗辅助震荡反应5min，再加入lml正己烷，震荡萃取，静置后得到己 烷层即为脂肪酸甲酯，可进行气相色谱分析；
[0012] (2)脂肪酸的气相色谱检测条件：
[0013]a、色谱柱：DB-23 毛细管柱（30mX0. 32mmX0. 25iim);
[0014]b、载气：氮气，，进样口温度270°C，FID检测器，检测器温度 280。。；
[0015] c、升温程序为：初温130°C，5°C/min升至170°C，再以3°C/min升温至220°C，保 持lOmin;
[0016] d、分流比为10:1，分流进样，进样量liiL;
[0017] e、脂肪酸成分构成，定性由与标准品的保留时间对照来确定，成分构成由各组分 对应峰面积归一化计算得来。
[0018] 同时，本发明除了应用在单藻落的脂肪酸成分分析，还可以应用在与单藻落等量 的微藻样品中，如可以将0. 01-5mg的藻粉使用同样的方法进行转酯化反应，即可快速的得 到其脂肪酸成分结果。这样便可以将此方法应用于培养过程的在线监测。
[0019] 本发明与现有技术相比具有如下优点：
[0020] ，可实现微藻培养过程监控；
[0021] ；
[0022] ，减少了操作步骤；
[0023] ，最快可在0. 5小时内完成检测，大大的节省了时间成本。
【具体实施方式】
[0024] 下面通过具体实施例对本发明方法和结果进行说明。
[0025] 使用气相色谱对其脂肪酸甲酯成分进行分析。
[0026] a、色谱柱：DB-23 毛细管柱（30mX0. 32mmX0. 25iim);
[0027]b、载气：氮气，，进样口温度270°C，FID检测器，检测器温度 280。。；
[0028] c、升温程序为：初温130°C，5°C/min升至170°C，再以3°C/min升温至220°C，保 持lOmin;
[0029] d、分流比为10:1，分流进样，进样量liiL;
[0030] e、脂肪酸成分构成，定性由与标准品的保留时间对照来确定，成分构成由各组分 对应峰面积归一化计算得来。
[0031] 藻种：湛江等鞭金藻（Isochry