bd流式细胞仪.doc

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. . 19〕、NK细胞〔CD16+56〕、辅助性T细胞〔CD3+CD4+〕和抑制性T细胞〔CD3+CD8+〕等。
应用实例：SimulSET系统利用CD14/CD45设门技术准确检测淋巴细胞亚群 比例。
* 其中绿色细胞群体为淋巴细胞，红色为单核细胞，蓝色为粒细胞。
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DNA分析
肿瘤细胞的DNA倍体分析是流式技术另一重要应用，临床上可对一些恶性肿瘤进展早期诊断，跟踪随访和早期治疗，大大提高一些肿瘤的治愈率和生存率。
检测原理：正常人体细胞的DNA含量是二倍体，细胞群体具有特定的增殖比例。通过检测细胞的DNA含量和增殖比例，可以了解细胞群体的倍体性和增殖能力。具体操作时，先将实体组织制备成单细胞悬液，用固定或去污剂在细胞膜上打孔，使DNA特异的荧光染料如PI〔碘化丙啶〕导入细胞核，PI和DNA缄基对特异结合后上机检测PI的荧光强度，并进展数据分析。
应用实例：乳腺癌病人的手术标本分析图。
*其中红色群体为二倍体，黄色群体为异倍体。
白血病和淋巴瘤免疫分型
正常白细胞在其分化过程中，随着系列的不同、成熟阶段的差异，会在细胞膜外表表达不同的分化抗原。白血病细胞则在癌变的过程中，丧失了正常细胞底系列专一性和分化阶段规律性，在本质上有别于正常骨髓细胞。应用此特点可进展免疫表型分析，以鉴别各种白血病和淋巴瘤，辅助临床诊断、评估疗效和预后。
常用的抗原包括：CD3、CD5、CD7、CD19、CD20、CD22、CD10、HLA-DR、
CD13、CD14、CD33、CD34、GLY-A、MPO等等。
应用实例：利用CD45三色分析急性髓性白血病。
* 左图为正常骨髓，绿色为正常淋巴细胞，深红为单核细胞，玫瑰红为成熟粒细胞，浅蓝为有核红细胞，深蓝为未成熟细胞；右图为急性髓性白血病图形，可见与正常明显的差异。
剩余白血病检测
剩余白血病是指经过适当的治疗、疾病缓解后仍残留在病人血中的极少量白
血病细胞。通常白血病病人经过化疗后的疾病复发率为60-80%，经过自体或异体骨髓移植后的复发率仍偏高〔20-50%〕。所以如果能早期检测到复发的迹象，即白血病细胞的再增生，则可以提前给予病人及时恰当的治疗。
依照不同的白血病，选用不同的抗体组合〔如下表〕来检测剩余白血病。流式细胞术可在一万个骨髓细胞中检测到一个白血病细胞；尤其是TdT的应用大大提高了检测灵敏度。
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白血病种类
可选择的抗体组合
T-ALL
cyto CD3/TdT
B-ALL
CD13/TdT，CD33/TdT
Pre-B-ALL
cyto μ/TdT
AML
CD13/TdT， CD33/TdT， CD7/TdT
5、网织红细胞分析
网织红细胞计数是骨髓红细胞造血功能的重要指标。传统手工计数耗时耗力，缺乏准确性。流式细胞仪网织红细胞计数系统由于采用系统试剂与全自动软件，可在短时内分析大量细胞，低水平网织红细胞也可到达统计分析精度，省时省力，结果正确可靠。
* 左图中红色群体为红细胞，右图利用RNA染料噻唑橙〔TO〕区分成熟红细胞和网织红细胞。
6、造血干祖细胞检测
在治疗恶