各期梅毒试验诊断方法.ppt

各期梅毒实验诊断方法
广东省皮肤病医院
广东省皮肤性病防治中心
郑和平 PhD
第一页，共七十五页。
“广东疮”
第二页，共七十五页。
广东与全国梅毒比较1995-2011(incidence/100,000)
，病原学检测：
1）暗示野镜检：
方法：渗出液混于盐水中，暗示野镜观察
结果：可见典型梅毒螺旋体和特殊运动方式
第十五页，共七十五页。
[5]R. Heymans, et al. J. CLIN. 48(2):497
2）暗示野与PCR检测.  [5] Clinical Value of Treponema pallidum Real-Time PCR for Diagnosis of Syphilis
第十六页，共七十五页。
[6]Molecular Characterization of Syphilis in Patients in Canada: Detection of Treponema pallidum DNA in Whole-Blood Samples versus Ulcerative Swabs J. CLIN. MICROBIOL. 2009,47（6）：1668
病人87例:41梅毒（19例一期,9例二期,10例潜伏,3例先天）
靶基因：T. pallidum tpp47, bmp, polA，23S rRNA gene
结果：
结论：溃疡拭子样本适合于一期梅毒的PCR检测
二期血液样本中50%活动性梅毒可检测到TP-DNA
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WHO推荐暗示野镜检诊断早期梅毒，早于抗体出现前数日至数周
organisms/mL required for visualization 敏感性80%，但阴性不能排除梅毒
[3]Larsen S, et al. Laboratory diagnosis and interpretation of tests for syphilis. Clin Microbiol Rev 1995;8:1–21.
假阳性:与口腔肛周其他螺旋体相似，不推荐口腔肛周标本
[4]Tramont E. Syphilis in adults: from Christopher Columbus to Sir Alexander Fleming to AIDS. Clin Infect Dis 1995;21:1361–71
。
病原体检测
第十八页，共七十五页。
二、血清学检查
非梅毒螺旋体抗原血清学试验
VDRL、USR、RPR、TRUST
2. 梅毒螺旋体抗原血清学试验
FTA-ABS、TPHA、 TPPA、ELISA、TP-RT
IgM
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非梅毒螺旋体抗原血清学试验：
原理：梅毒螺旋体破坏宿主细胞释放以及其螺旋体细胞表面释放的类脂物质，刺激机体产生抗类脂抗体（反应素）。在体外该抗体与心磷脂、卵磷脂和胆固醇组成的抗原反应，形成凝集反应。
方法：VDRL (venereal disease research laboratory test)
USR (unheated serum reagin test)
RPR (rapid plasma reagin circle card test)
TRUST (tolulized red unheated serum test)
特点：非特异性反应
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2、梅毒螺旋体抗原血清试验
原理：基于TP特异性抗原，检测TP抗体
方法：
凝集法：TPHA， TPPA
FTA－ABS
ELISA
19sIgM
TP-RT（胶体金法）
第二十一页，共七十五页。
[19]S Ratnam. The laboratory diagnosis of syphilis. Can J InfectDis Med Microbiol 2005;16(1):45-51.
第二十二页，共七十五页。
1）TPPA/TPHA
原理：
超声裂解TP抗原或基因工程抗原，致敏明胶颗粒/家禽RBC，与血清中抗TP抗体结合，发生凝集反应。
临床：梅毒确证
注意
存在交叉（1：80）
低滴定时候，FTA-ABS确证
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2）FTA-ABS(fluoresent treponemal antibody absorption test)
原理：血清经吸收剂（Reiter)去非特异性抗体，与TP反应，形成Ab+Ag复合物；再