紫外杀菌效果实验设计.doc

紫外杀菌效果的检测
一、 实验目的
了解紫外线杀菌的原理。
分析影响紫外线杀菌效果的因素及其影响程度。
学会用控制变量法分析实验现象。
进一步巩固微生物的培养及平板计数法的操作方法。
二、 实验原理
除光合细菌外，一般细菌都不紫外杀菌效果的检测
一、 实验目的
了解紫外线杀菌的原理。
分析影响紫外线杀菌效果的因素及其影响程度。
学会用控制变量法分析实验现象。
进一步巩固微生物的培养及平板计数法的操作方法。
二、 实验原理
除光合细菌外，一般细菌都不喜欢光线。许多微生物在日光直接 照射下容易死亡，特别是病原微生物。日光中具有杀菌作用的主要成 分是紫外线。细菌细胞吸收紫外线后，会因其蛋白质和核酸发生变化 而引起死亡。
紫外线是非电离辐射，以波长265-266nm的杀菌力最强。紫外辐 射对微生物有明显的致死作用，是强杀菌剂。紫外线杀死细胞的主要 原理是紫外线会破坏细胞中的蛋白质、DNA,使DNA中的胸腺H密啜结 合成胸腺嚅嚏二合体，影响转录和复制，从而杀死细胞，因此紫外线 常用于紫外诱变。但紫外线的穿透性很弱，因此只有表面杀菌能力， 紫外线不能透过普通玻璃，但可以透过一定厚度的空气。一般细菌在 紫外线下照射
5min即能被杀死，芽抱则需lOmino而紫外线距离细 菌的远近也影响着紫外线的杀菌效果。
杀菌率 q = N/N0X 100%, N为杀菌处理后的细菌数（个/L）, NO 为杀菌处理前的细菌数（个/L）.
三、 主要仪器设备及耗材
器材：一盏20W普通型紫外线灯，培养皿，试管，移液管，玻璃 柜，普通玻璃片，石英片，普通光学显微镜
菌种：枯草芽泡杆菌，金黄色葡萄球菌
试剂：牛肉膏蛋白月东培养基，无菌水
四、 实验步骤
（一） 、菌种的制备
将所需数量的培养皿、试管、移液管等洗涤干净并灭菌。
配制牛肉膏蛋白月东培养基，分装，分装好后马上进行灭菌处 理。将枯草芽泡杆菌和金黄色葡萄球菌菌种接种到已处理好的固体培 养基中。
将接种好的固体培养基加热至40 °C—50 °C使其融化成液体培 养基。
将已培养好的枯草芽泡杆菌和金黄色葡萄球菌试样用无菌水 稀释到适宜浓度。
（二） 、检测照射时间对紫外杀菌效果的影响
准备好两个方形大普通玻璃柜分别为玻璃柜1和玻璃柜2 （两个玻璃柜中均为无菌环境），将紫外灯安装在玻璃柜1的柜壁上,
玻璃柜2中不放置紫外灯，其他环境条件与玻璃柜1相同。
用试管取1ml已计数好细菌数量的枯草芽泡杆菌液，记为试 管1,另取一试管装入同一浓度下的枯草芽泡杆菌液ImL并计好数, 记为试管2.
以同样方法取两支金黄色葡萄球菌液，并分别记为试管3
和试管4.
将试管1和试管3放入玻璃柜1中距离紫外灯5cm处，同 时将试管2和试管4放入玻璃柜2中（对照试验），并开始计时。
分别在杀菌3min, 5min, 6min, 7min, 8min,后从四支试管中 取样，并用平板计数法计所剩细菌数，并记录在表格一中。
（三） 、检测紫外灯离菌距离对杀菌效果的影响
取六支已装入计好数的枯草芽泡杆菌液，分别标记为试管 la,试管lb,试管lc,试管2a,试管2b和试管2c。
已同样方法取6支已装入计好数的金黄色葡萄球菌液，分 别标记为试管3a,试管3b,试管3c,试管4a,试管4b和试管4