过氧化氢酶.ppt

关于过氧化氢酶
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第一张，共十五张，创建于2022年，星期一
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过氧化氢酶
第二张，共十五张，创建于2022年，星期一
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过氧化氢酶的简介及来源
过氧化氢酶的制备
过氧化氢酶活性的测定关于过氧化氢酶
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第一张，共十五张，创建于2022年，星期一
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过氧化氢酶
第二张，共十五张，创建于2022年，星期一
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过氧化氢酶的简介及来源
过氧化氢酶的制备
过氧化氢酶活性的测定
过氧化氢酶的应用
过氧化氢酶的展望
第三张，共十五张，创建于2022年，星期一
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过氧化氢酶，是催化过氧化氢分解成氧和水的酶，存在于细胞的过氧化物体内。过氧化氢酶是过氧化物酶体的标志酶, 约占过氧化物酶体酶总量的40%。过氧化氢酶存在于所有已知的动物的各个组织中，特别在肝脏中以高浓度存在。
简介：
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几乎所有的生物机体都存在过氧化氢酶。其普遍存在于能呼吸的生物体内，主要存在于植物的叶绿体、线粒体、内质网、动物的肝和红细胞中，其酶促活性为机体提供了抗氧化防御机理。
过氧化氢酶的来源：
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，加入2～3ml 4℃，转入25ml容量瓶中，并用缓冲液冲洗研钵数次，合并冲洗液，并定容到刻度。混合均匀将量瓶置5℃冰箱中静置10min，取上部澄清液在4000r/min下离心15min，上清液即为过氧化氢酶粗提液。5℃下保存备用。
过氧化氢酶的提取：
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过氧化氢酶的提取：
得到酶粗液后，利用硫酸铵分级沉淀，加入固体硫酸铵至30%饱和度，4 ℃ 冰箱静置2h后，12000r/min离心30min，弃沉淀，量上清液。取再加入硫酸铵至40%饱和度，12000r/m离心30min，弃上清，留沉淀，()溶解，4 ℃、 的磷酸缓冲液透析过夜，再进行离子交换层析，凝胶过滤柱层析，最后是过氧化氢酶活性的测定。
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过氧化氢酶活性的测定：
分光光度法
荧光测定
同位素标记法
电化学法
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H2O2在240nm波长下有强烈吸收，过氧化氢酶能分解过氧化氢，使反应溶液吸光度(A240)随反应时间而降低。根据测量吸光率的变化速度即可测出过氧化氢酶的活性。
紫外吸收法：
过氧化氢酶活性的测定：
HMB是一种快速测定过氧化氢酶含量的方法，检测板放置在白水中一定时间后取出，不要接触检测板的表面，将其放在检测试管中，试管中装有一定量的稀释液和反应物。向试管中滴加10滴HMB 50R试剂（HMB 50R是一种强氧化剂），放置15min，然后将试管放在HMB测定仪中读取数据。该方法可用于工厂中直接测量过氧化氢酶的含量。
HMB法：
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过氧化氢分解酶随pH 值和温度的改变, 其活力随之变化, 在pH=7左右和30～40 ℃活性最大。过氧化氢浓度增大, 会加快分解反应速度, 但必须注意当浓度大于一定量时, 酶的作用将减弱, 这样过多的残留H2O2 对纤维和染料是不利的。所以不能因为有了H2O2 分解酶, 就能任意地加大H2O2 的用量。　
使用时, 通常要注意H2O2 分解酶对常用表面活性剂和H2O2 稳定剂的相容性, 实际生产应用pH为6～8 , 温度20～55 ℃, 酶用量5～10KCLU/ 升,时间10～20min。此技术已慢慢地被国内所认识和接受, 它对提高活性染料色泽鲜艳度很有利。
过氧化氢酶的工艺要求：
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应用
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实验室中还常常被用作了解酶对反应速率影响的工具。
应用
食品工业中被用于除去用于制造奶酪的牛奶中的过氧化氢。过氧化氢酶也被用于食品包装，防止食物被氧化。
纺织工业中，过氧化氢酶被用于除去纺织物上的过氧化氢，以保证成品是不含过氧化物的。
美容业中的使用,一些面部护理中加入了该酶和过氧化氢，目的是增加表皮上层的细胞氧量。
隐形眼镜的清洁上,眼镜在含有过氧化氢的清洁剂中浸泡后，使用前再用过氧化氢酶除去残留的过氧化氢。
医学上，也可作为工具酶，用于检验尿糖和血糖。现代医学上认为机体衰老与氧化有关，例如染色体、酶等的氧化。所以，一些有还原性功能的物