高效液相色谱法测定骨康口服液中补骨脂素和异补骨脂素的含量.doc

高效液相色谱法测定骨康口服液中补骨脂素和异补骨脂素的含量.doc高效液相色谱法测定骨康口服液中补骨脂素和异补骨脂素的含量作者:钟镜金黄晓其龙彦纲曾惠芳苏子仁【摘要】目的建立骨康口服液中有效成分的含量测定方法。方法采用 HPLC 法测定骨康口服液中有效成分含量。结果补骨脂素和异补骨脂素两种成分均达到良好分离,在测定范围内线性良好, 回收率均在 99% ~ 101% 之间。结论所建立的定量方法简便可行、重复性好,可作为骨康口服液的质量监控。【关键词】骨康口服液补骨脂素异补骨脂素高效液相色谱法 Abstract:ObjectiveTo establish a method of HPLC for determining psoralen and isopsoralen in Gukang Oral Liquid. MethodsThe effective ponents in Gukang Oral Liquid ined by HPLC. ResultsThe resolution and the linearity ethod for determining the ingredients of Gukang Oral Liquid is simple, feasible and repeatable, and can be used for quality control of Gukang Oral Liquid. Key eleon 色谱工作站;补骨脂素(供含量测定用, 110739- 200309 )、异补骨脂素( 供含量测定用, 110738-200410) ,均由中国药品生物制品检定所提供;骨康口服液(批号: 20061009 , 20061012 , 20061015 ),由广州中医药大学新药开发研究中心提供;乙腈为色谱纯( Merck , 1192230 )其他试剂均为分析纯。 2 方法与结果 色谱条件色谱柱: Phenomenex luna C18 柱(250 mm × mm , 5μ m) ; 流动相:以乙腈为流动相 A ,以 % 冰醋酸为流动相 B ,按表 1中的规定进行梯度洗脱;检测波长: 246 nm ;流速: ml· min-1 ; 柱温: 25℃;进样量: 10μ l ;理论塔板数均不低于 3 000 。 溶液的制备 对照品溶液的制备精密称取补骨脂素、异补骨脂素对照品适量,分别置 25 ml量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,以此作为对照品贮备液。精密吸取上述各对照品贮备液适量,加甲醇制成每毫升含补骨脂素 35μ g ,异补骨脂素 44μ g 的混合溶液,摇匀即得。 供试品溶液的制备取本品 10 支,混匀,精密吸取药液 10 ml ,加乙醚提取 4 次, 10 ml/ 次,分取乙醚层, 60℃挥干乙醚, 用甲醇溶解残渣,并转移至 5 ml 容量瓶中,用甲醇加至刻度,摇匀,滤过,取续滤液即得。 阴性对照溶液的制备取处方中除补骨脂外的其余成分制成缺补骨脂阴性对照品,按“ ”项下的供试品制备方法处理得缺补骨脂阴性对照液。 线性关系考察精密吸取对照品溶液 2,4,6,8, 10, 14μl 进行色谱测定, 按上述色谱条件测定峰面积,并以峰面积( Y )对进样量( X )进行回归,补骨脂素在 70~