紫金龙总生物碱超声波辅助提取工艺.doc

紫金龙总生物碱超声波辅助提取工艺
　　紫金龙总生物碱超声波辅助提取工艺
　　摘要：采用酸性染料比色法测定紫金龙〔Ｄａｃｔｙｌｉｃａｐｎｏｓｓｃａｎｄｅｎｓ〕总生物碱的含量，通过正交设计方法，以总生物碱提取率为评价指标，优化超声波辅助提取ｒａｃｔｉｏｎｃｒａｆｔｗａｓｕｌｔｒａｓｏｎｉｃａｓｓｉｓｔｅｄｅｘｔｒａｃｔｉｎｇｆｏｒ４０ｍｉｎｕｓｉｎｇ９－ｆｏｌｄｏｆ８０％ｅｔｈａｎｏｌ，ｕｎｄｅｒｗｈｉｃｈｔｈｅｙｉｅｌｄｏｆｔｏｔａｌａｌｋａｌｏｉｄｓｃｏｕｌｄｂｅ２．６９％．
　　Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｄａｃｔｙｌｉｃａｐｎｏｓｓｃａｎｄｅｎｓ；ｔｏｔａｌａｌｋａｌｏｉｄｓ；ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃａｓｓｉｓｔｅｄｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌｄｅｓｉｇｎ
　　紫金龙又称串枝莲、兹坚轮〔白族语〕等，系罂粟科植物紫金龙［Ｄａｃｔｙｌｉｃａｐｎｏｓｓｃａｎｄｅｎｓ〔Ｄ．Ｄｏｎ〕Ｈｕｔｃｈ．］的枯燥根，其味苦、辛，性凉，具镇痛、止血、消炎、降压，治疗胃痛、牙痛、神经性头痛、血崩、内出血、跌打损伤、高血压等作用［１］。生物碱是紫金龙的主要药效物质［２－４］，有关其提取工艺的研究少见报道［５］。鉴于从紫金龙中用超声波辅助提取生物碱的研究未见文献报道，采用正交试验设计，对影响总生物碱提取率的多个因素进展了考察，以期优选出超声波辅助提取紫金龙总生物碱的最正确工艺条件。
　　１材料与方法
　　１．１材料
　　，购于长春市药材公司，粉碎过４０目筛，备用。
　　，购于中国药物生物制品检定所；溴甲酚绿、硫酸、醋酸钠、醋酸、三氯甲烷、乙醇等为分析纯，购于国药集团化学试剂。
　　１．2方法
　　１．2．１对照品溶液的配制［６］精细称取经Ｐ２Ｏ５真空枯燥的异紫堇定对照品，置容量瓶内，参加０．０１％〔Ｖ／Ｖ，下同〕硫酸溶液，超声溶解并定容，配制成浓度为０．１６５ｍｇ／ｍＬ的对照品储藏液，然后分别精细汲取１、２、４、６、８和１０ｍＬ，置１００ｍＬ容量瓶内，参加０．０１％硫酸溶液定容，即得一系列浓度的异紫堇定对照品溶液。
　　１．2．２标准曲线的绘制［６］精细汲取上述一系列浓度的对照品溶液１．０ｍＬ，置分液漏斗中，依次参加ｐＨ为３．０的醋酸盐缓冲液２．０ｍＬ、０．０００７ｇ／ｍＬ溴甲酚绿溶液１．０ｍＬ、三氯甲烷１５．０ｍＬ，振荡２ｍｉｎ后，静置１５ｍｉｎ分层，三氯甲烷层用枯燥的滤纸滤过，搜集的滤液即为对照品测定液，以空白对照液为空白，于４１５ｎｍ波长处测定吸光度〔Ａ〕。以吸光度〔Ａ〕为纵坐标，异紫堇定的浓度〔Ｃ〕为横坐标，进展线性回归，得标准曲线方程为■＝５１．７４９x＋０．０４２〔ｒ＝０．９９９９〕；线性范围是０．００１６５～０．０１６５０ｍｇ／ｍＬ。
　　１．2．３样品溶液的制备和总生物碱含量测定将紫金龙药材粗粉１０ｇ，用乙醇溶液溶解后超声波辅助提龋提取液合并、浓缩，定容至５０ｍＬ，精细量取１ｍＬ，置圆底烧瓶内，蒸干，残渣再用体积分数为１％的硫酸溶液１０．０ｍＬ溶解，转入１０００ｍＬ容量瓶中，去离子水定容，摇匀，精细量取１．０ｍＬ置分液漏斗中，按前述方法测定吸光度〔Ａ〕，计算总生物碱的含量及提取率，提取率＝〔样品中总生物碱的重量／药材重量〕１００％。
　　１．2．４提取工艺优化根据紫金龙中生物碱的种类和