上清丸质量标准的研究.doc

上清丸质量标准的研究
肖 燕【摘 要】:目的:建立上清丸的质量控制方法。方法:采用高效液相色谱法测定方中君药黄芩中黄芩苷的含量,同时对大黄和黄柏进行薄层色谱鉴别。结果:~(r=)与酯-甲酸(1551)的上层溶液为展开剂,展开,取出,晾干。置紫外光灯(365nm)下检视,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。用氨气熏蒸后,置日光下检视,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。阴性对照品无干扰,见图1A。
黄柏的鉴别 取本品2g,剪碎,加甲醇10mL,加热回流15min,放冷,滤过,滤液浓缩至5mL,作为供试品溶液2。同法制得缺黄柏的阴性对照品溶液。,同法制成对照药材溶液;取盐酸小檗碱对照品,,作为对照品溶液。照薄层色谱法试验,吸取上述4种溶液各2μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以苯-乙酸乙酯-异丙醇-甲醇-浓氨溶液(126333)为展开剂,置氨蒸气预饱和的展开缸中展开,取出,晾干。置紫外光灯(365nm)下检视,供试品色谱中,在与对照药材及对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。阴性对照品无干扰,见图1B。
黄芩苷含量测定
色谱条件 色谱柱:DikmaDiamonsilTM(钻石)C18柱(250mm×,5μm);流动相:甲醇-水-冰醋酸(55451);流速:?min-1;柱温:30℃;检测波长:274nm;进样量:10μL。按黄芩苷峰计算,理论板数不低于4000。
溶液制备2 ,置100mL量瓶中,加甲醇使溶解并稀释至刻度,摇匀,。取重量差异项下的本品,剪碎,混匀,,精密称定,精密加稀乙醇50mL,称定重量,超声处理30min,加热回流1h,放冷,称定重量,用稀乙醇补足重量,用微孔滤膜()滤过,取续滤液,即得供试品溶液。取缺黄芩阴性样品适量,照供试品溶液制备方法制得阴性供试品溶液。
方法学考察 阴性干扰实验:分别吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照品溶液各10μL,按上述色谱条件分别进样测定并记录色谱图。结果显示,阴性对照溶液对测定结果无干扰。(见图2)

线性关系考察:,,,,、,分别注入液相色谱仪测定,在上述色谱条件下测定峰面积,以进样量为横坐标(X)、峰面积积分值为纵坐标(Y),绘制标准曲线,得回归方程为Y=-,r=(n=6),~。
精密度试验:按上述色谱条件,用同一供试品溶液连续进样6次,每次10μL,分别测得各次峰面积。%,表明仪器精密度良好。
稳定性试验:取同一批供试品溶液(批号为20070906),分别在0,2,4,8,10,12h时进样1次,测定峰面积。结果黄芩苷的峰面积无