血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳及其定量实验报告.pdf

生物化学实验报告




姓 名：

学 200,000 2 ～5
α2－球蛋白 300,000 4 ～9
β－球蛋白 90,000 ～150,000 ～12
γ－球蛋白 ～ 156,000～950,000 12～20
缓冲液 pH=，pI＜pH。
血清蛋白带负电荷，在电场中向正极移动。预测血清蛋白电泳区带图
血清蛋白依次分为清蛋白，球蛋白的α1、α2、β、γ五个区带

.①膜条经过氨基黑 10B 染色后显出清晰色带；②各色带蛋白质含量与染料结合
量基本成正比；③可将各色带剪开，分别溶于碱性溶液中；④用分光光度法计算各种蛋
白质的百分数。
三、材料与方法：
：
：①样品：健康人血清（新鲜、无溶血）；②巴比妥-巴比妥钠缓
冲液（，离子强度 ）；③氨基黑 10B 染色液；④漂洗液；⑤洗脱液：
溶液。
：①V-1100 分光光度计（×1）；②恒温水浴箱（×1）；③试管（×
6）、试管架（×1）；④1000μL 加样枪（×1）、加样枪架（×1）；⑤醋酸纤维薄膜
（2cm*8cm，厚度 120μm）；⑥培养皿（×5）；⑦点样器或载玻片（× 1）；⑧平头镊
子（×2）；⑨剪刀（×1）；⑩电泳槽（×1）；⑪直流稳压电泳仪（×1）

1．准备与点样：①取 2×8cm 的膜条；②亚光面距一端 处取一点样线；③充
分浸透在巴比妥缓冲液中；④取出膜条，用滤纸吸去多余的缓冲液；⑤点样器下端粘上
薄层血清；⑥垂直点样。
点样示意图：
注意：点样线尽量点得细窄而均匀。8cm
+
—
m
点样线
小组标记