蛋白质的结构 (2).ppt

关于蛋白质的结构 (2)
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第一张，共八十七张，创建于2022年，星期一
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Cα
第二张，共八十七张，创建于2022年，星期一
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2．根据分子的形状：
（1）球状蛋白质――分子对称性佳，外十七张，创建于2022年，星期一
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催产素
加压素
第十七张，共八十七张，创建于2022年，星期一
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1. 谷胱甘肽（glutathione, GSH）：
是一种称为-谷氨酰半胱氨酰甘氨酸的三肽化合物。
第十八张，共八十七张，创建于2022年，星期一
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还原型与氧化型谷胱甘肽的相互转变
Glu-Cys-Gly
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S
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S
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Glu-Cys-Gly
-2H
+2H
谷胱甘肽分子中的巯基可氧化或还原，故有还原型（GSH）与氧化型（GSSG）两种存在形式。
2× Glu-Cys-Gly
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SH
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解毒作用：与毒物或药物结合，消除其毒性作用；
参与氧化还原反应：作为重要的还原剂，参与体内多种氧化还原反应；
保护巯基酶的活性：使巯基酶的活性基团-SH维持还原状态；
维持红细胞膜结构的稳定：消除氧化剂对红细胞膜结构的破坏作用。
谷胱甘肽的生理功用：
第二十张，共八十七张，创建于2022年，星期一
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种类较多，生理功能各异。
多肽类激素主要见于下丘脑及垂体分泌的激素，如催产素（9肽）、加压素（9肽）、促肾上腺皮质激素（39肽）、促甲状腺素释放激素（3肽）。
神经肽主要与神经信号转导作用相关，包括脑啡肽（5肽）、-内啡肽（31肽）、强啡肽（17肽）等。
2. 多肽类激素及神经肽：
第二十一张，共八十七张，创建于2022年，星期一
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胰岛素（Insulin）
由51个氨基酸残基组成，分为A、B两条链。
A链21个氨基酸残基，B链30个氨基酸残基。
A、B两条链之间通过两个二硫键联结在一起，A链另有一个链内二硫键。
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核糖核酸酶的一级结构
第二十三张，共八十七张，创建于2022年，星期一
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一级结构是研究高级结构的基础。
从分子水平阐明蛋白质的结构与功能的关系(例）。
为生物进化理论提供依据（例）。
为人工合成蛋白质提供参考顺序。
测定蛋白质一级结构的主要意义：
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蛋白质一级结构的测定
测定多肽链的数目
拆分多肽链
断开多肽链内的二硫键
测定每一肽链的氨基酸组成
鉴定多肽链的N-末端和C-末端
裂解多肽链为较小的肽段
测定各肽段的氨基酸序列
利用重叠肽重建完整多肽链的一级结构
确定二硫键的位置
第二十五张，共八十七张，创建于2022年，星期一
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蛋白质测序的重要方法
N-末端测定
二硝基氟苯（DNFB）法：肽游离末端NH2与DNFB反应生成DNP-肽，最后水解生成黄色DNP-氨基酸
丹磺酰氯（DNS）法：用DNS取代DNFB，生成DNS-氨基酸
苯异硫氰酸（PITC）法：生成PTH-氨基酸，从肽上断裂下来
氨肽酶法：外切酶，但效果不好
C-末端测定
肼解法：测定C-末端的最重要的化学方法，肽与肼反应，除C-末端氨基酸游离外，其他氨基酸转变为氨基酸酰肼化物
还原法：C-末端氨基酸用硼氢化锂还原成相应的α-氨基醇
羧肽酶法：最有效、最常用
羧肽酶A
羧肽酶B
羧肽酶C
羧肽酶Y
二硫键的断裂
过甲酸氧化法：将二硫键氧化成磺酸基
巯基化合物还原法：将二硫键还原成巯基，然后用烷基化试剂如碘乙酸保护巯基，防止其重新被氧化
第二十六张，共八十七张，创建于2022年，星期一
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氨基酸组成的测定：
酸水解：是主要方法，多用HCl，同时辅以碱水解；所得氨基酸不消旋，但Trp全部被破坏，Ser，Thr，Tyr部分破坏，Asn和Gln的酰氨基被水解，生成Asp和Glu；
多肽链的裂解
酶裂解：
胰蛋白酶：专一性强，断裂Lys或Arg的羧基参与 形成的肽键
糜蛋白酶：断裂Phe，Trp，Tyr，Leu等疏水氨基酸的羧基端肽键
嗜热菌蛋白酶：专一性差，断裂Val，Leu，Phe，Tyr，Trp等氨基参与形成的肽键
胃蛋白酶：在酸性条件稳定，肽键 两侧均为疏水氨基酸。在确定二硫键位置时，常用到此酶。
其它酶：略
化学裂解
溴化氰（CNBr）：只断裂Met的羧基形成的肽键
羟氨（NH2OH）：在pH9时，