【目的与要求】
重点掌握
★氨基酸的结构特点、光学性质、等电点、两性性质
★一级结构、肽键、肽平面结构、N一末端、C一末端、
★二级结构,包括a-螺旋体、折叠片
★三级结构、次级键
★四级结构;常见的20种氨基酸均为L型.
三。氨基酸的理化性质
(一)物理性质
.旋光性:除甘纨酸外的氨基酸均有旋光性.
.紫外光吸收:氨基酸在可见光范围内无光吸收,在近紫外区含苯环氨基酸有光的吸收. (二)化学性质
.氨基酸的两性电离及等电点:
氨基酸具有酸碱两性性质。通常以兼性离子的形式存在,
在酸性环境中,主要为阳离子
在碱性环境中,主要为阴离子.
在某一 pH环境下,为两性离子(兼性离子)。
氨基酸的pl:第基酸所带正负电荷相等时的溶液pHo 图解:
曲线中从左向右第一个拐点是氨基酸竣基解离50%的状态,
>第二个拐点是氨基酸的等电点,
第三个拐点是氨基酸氨基解离50%的状态。
pl = <p4+p0/2
通过氨基酸的滴定曲线,可用下列Henderson—Hasselbalch方程求出各解离基团的解离常 数(K)
[质子受体][H+]
Kal=- [质子供体]
TT ",1 I蔚子受体]
pH = p« + log 旃丽
根据PK,可求出氨基酸的等电点,可由其等电点左右两个
PK,值的算术平均值求出.
氨基酸等电点的计算
中性氨基酸:pI=(pK]+p!C2) /2
K」为« 一竣基的解离常数,K12为。-氨基的解离常数。
等电点的特点:
:♦
:♦ 2。氨基酸为两性离子;
:♦ 3。溶解度最小;
:♦当pH大于pl时,Aa带负电
:♦当pH小于pl时Aa带正电
解离质子的顺序为:。-COOH>R-COOH>R—NH. + > « —NH31
接受质子的顺序:a -NH2>R-NH2>R—COO > a —COO'
2。由a—氨基参加的反应:
(1)与2, 4一二硝基氟苯(2, 4-DNFB)的反应(Sanger反应):生成黄色物。
⑵与苯异硫忸酸酯(PITC)反应(Edman反应):生成无色物。
(3)与丹磺酰氯(DNS-C1)的反应:生成荧光物。
用于蛋白质的N-末端的测定。
a-较基参加的反应:
(1)与碱反应成盐(2)与醇反应成酯
(3)与酰化试剂反应成酰氯
4。a —氨基与a -叛基共同参加的反应
与荀三酮的反应:可与其它氨基酸生成蓝紫色化合物。脯第酸与羟脯氨酸为黄色化合物。
5。侧链反应(颜色反应):
Millon反应:Tyr产物:红色的化合物。
Folin反应:Tyr。产物:蓝色的铜蓝、铝蓝。
(3)坂口反应:Arg。产物:砖红色的沉淀。
(4) Pauly反应:检测His、Tyr及残基产物:橘红色的化合物。
(5)乙醛酸的反应:检测Trp及残基。分层现象,界面出现紫色环。
(6) Cys的反应:Cys、及残基产生一种红色的化合物.
§
/一级结构
蛋白质的结构一空间结构(构象)一二级结构一超二级结构
、三级结构*•结构域/
、四级结构
一、蛋白质的一级结构(Primarystructure)
蛋白质的一级结构(共价结构或化学结构):它是指蛋白质多肽链中Aa连接方式、排
列顺序、组成。
肽键与肽
(-)肽键与肽
U肽键:一个氨基酸的a・COOH和相邻的另一个氨基酸的a-NH2脱水形成共价键。
:氨基
D二肽;
2)三肽;
3)多肽;
N-末端:肽链端有自由a・NH2的一端(氨基末端),
C一末端:肽链端有自由a・COOH端称为(裁基末端);
5)氨基酸残基:构成肽链的氨基酸(残缺不全)
6)多肽链的方向:一般一NHz端开始,N端为头(左),C端为尾(右
★肽的命名
如:Ghi—Ala-Asp—His-Arg
•可命名为谷氨酰一丙氨酰一天冬氨酰-组氨酰一精氨酸
(二)天然活性肽
自然界中自由存在的活性肽,如:
谷胱甘肽(GSH);三肽(Glu-Cys-GIy),生物体内的抗氧化剂
青霉素:含有D・半胱氨酸和D一缀氨酸的二肽衍生物。主要破坏细菌的细胞壁粘肽的合成引 起溶菌。
二、蛋白质的二级结构
(一)构型与构象
构型:指一个不对称不化合物中不对称中心上的几个原子或基团的空间排布方式。氨基酸 的D・、L・,会牵涉及共价键的形成或破 坏。
构象:指一个分子结构中的一切原子绕共价单键旋转时产生的不同空间排列方式。一种构象 变成另一种构象不涉及共价键的形成或破坏。
(二)蛋白质的二级结构
二级结构的概念:多肽链在一级结构的基础上
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