克隆(clone)来自同一始祖的相同副本或拷贝的集合
克隆化(cloning),获取同一拷贝的过程称为克隆化即无性繁殖。
DNA克隆:应用酶学的方法,在体外将各种来源的遗传物质(同源的或异源的、原核的或真核的、天然的或人工的DNA)与载再连接,在两个DNA分子同源序列间进行单链或双链片段的交换称为同源重组又称基本重组。是最基本的DNA重组方式.
位点特异重组(site-specificrecombination)是由整合酶催化,在两个DNA序列的特异位点间发生的整合。
整合酶(integraseInt):由入噬菌体int基因编码,指导入噬菌体DNA插入到宿主的染色体中。
整合宿主因子(integrationhostfactorIHF)由大肠杆菌产生,结合于attP,对整合起促进作用。
切除酶(excisionaseXis)由入噬菌体xis基因编码。指导入噬菌体DNA从宿主的染色体中切出来。
重组信号序列(recombinationsignalsequence,RSS)。此重排的重组酶基因rag(recombinationactivatinggene)共有两个,分别产生蛋白质RAG1和RAG2。RAG1识别信号序列,然后RAG2加入复合物,九核苷酸提供最初的识别位点,七核苷酸为切割位点。
转座重组(transposition)由插入序列和转座子介导的基因移位或重排
37.转座子:可从一个染色体位点转移到另一位点的分散重复序列。
DNA损伤:在复制过程中发生的DNA突变称为DNA损伤。
碱基的异构互变:烯醇式与酮式碱基间的互换,可导致碱基配对间氢键改变,可使A配C,U配G。
碱基的脱氨基作用:碱基的环外氨基会自发脱落,从而使胞嘧啶(C)变成尿嘧啶(U),腺嘌吟会变成次黄嘌吟(H)、鸟嘌吟变成黄嘌吟(X)等,复制时U配A,H和X配C,导致子代DNA序列的错误。
碱基修饰与链断裂:细胞呼吸的产物02-、H2O2会造成DNA单链断裂。
紫外线(ultraviolet,UV)引起的DNA损伤:紫外线照射,可使同一条DNA链上相邻的嘧啶形成二聚体,相邻的两个T、或
两个C、或C与T之间都可以形成二聚体,最容易形成的是TT二聚体。
DNA链断裂:电离辐射可导致脱氧核糖破坏或磷酸二酯键断开而致DNA链断裂。
碱基变化:主要是由OH-自由基引起,包括DNA链上的碱基氧化修饰、过氧化物的形成、碱基环的破环和脱落。
点突变:DNA分子上单一碱基的改变称点突变(pointmutation)。
转换:发生在同型碱基之间,即嘌吟代替另一嘌吟,或嘧啶代替另一嘧啶。
颠换:发生在异型碱基之间,即嘌吟变嘧啶或嘧啶变嘌吟。
缺失:一个碱基或一段核苷酸链从DNA大分子上消失。
插入:原来没有的一个碱基或一段核苷酸链插入到DNA大分子中间。
框移突变是指三联体密码的阅读方式改变,造成蛋白质氨基酸排列顺序发生改变。-
转位:指DNA链重组使其中一段核苷酸链方向倒置、或从一处迁移到另一处。
分子生物学是在生物化学,遗传学和细胞生物学基础上发展起来的一门新兴交叉学科,是一门从分子水平上研究生命活动及其规律的科学,是当代生命科学中的前沿学科。
医学分子生物学是分子生物学的一个重要分支,它以人体为研究对象,主要研究人体在正常和疾病下,信息大分子——核
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