遗传印记基因PEG10在肝癌中表达特异性及其意义.pdf

华中科技大学同济医学院硕士学位论文
\遗传印记基因诟伟┲斜泶锏奶匾煨约捌湟庖华中科技大学同济医学院附属同济医院肝病研究所摘要研究生:常莹导师:林菊生华中科技大学同济医学院目的:研究遗传印记基因诟伟┳橹斜泶锏奶匾煨裕霸诓煌琢鱿胞中的表达情况,为其作为一个潜在的肝癌特异标志物和蛑瘟频男碌分子靶点提供实验依据。材料与方法:从来自不同器官组织的肿瘤细胞系烁伟┫赴闔、人胃癌细胞株⑷私岢Π┫赴闘⑷艘认侔┫赴關、人黑色素瘤细胞株、人馨土鱿赴闖、例肝癌患者的肝癌组织、癌旁组织、例良性肝病患者肝组织、例正常人外周血单个核细胞中抽提总纯化后经逆转录合成,再以椒ḿ觳釶的表达。同时,肝癌组织和癌旁组织标本经二觳釧的表达。结果:经扩增的蚱挝,虻睦┰銎挝朐杓埔恢拢籔在人肝癌细胞株忻飨员泶铮宋赴┫胞株⑷私岢Π┫赴闘⑷艘认侔┫赴關中弱表达,而正常人胚胎肝细胞株推渌琢鱿赴人馨拖赴觥⑷撕谏亓中表达为均阴性。在例肝癌及相应癌旁组织中,%;而虻难粜月史直鹞%>璏’检验,显示蛟诟伟┳┡宰橹蠵表达率/明显低于泶锫/!.,。另外对例良性硕士学位论文
细胞系而言,其表达具有相对的器官组织特异性,即消化道肿瘤特异性。本实关键词:肝癌;遗传印记基因;换蛑瘟疲环肿影华中科技大学同济医学院硕士学位论文肝病患者斡不例,自身免疫性肝病窝9芰例,丙型肝炎血色素病肝组织标本及正常人的外周血细胞进行虮泶锏募测,结果均为阴性。结论:谋泶锞哂斜華更高的肝癌组织特异性湍壳八觳獾闹琢验为遗传印记基因魑R桓鲂碌母伟┍曛疚锖突蛑瘟频姆肿影械闾供了实验依据。
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前言原发性肝细胞癌籋且恢秩蛐愿叨榷裥的肿瘤。根据年耐臣疲澜鏗发病率占男性肿瘤的第唬女性肿瘤的第弧C磕杲万人死于本病。在我国,在过去短短的年中,佣裥灾琢鏊酪虻牡位跃居第弧>」芙昀从肯殖鲂矶嘈碌闹瘟剖段,但脑ず笪吹玫矫飨愿纳啤V琢龅幕蛑瘟剖墙昀囱芯康娜鹊悖现了许多与肝癌发病相关的靶分子,如、籟、——、、等,但研究表明,它们都只在部分肝癌中起致癌作用且缺乏特异性“R虼耍罢也斡刖蠖嗍伟┓⒉〉墓丶缘奶匾旆肿影惺窍纸锥蜨基因治疗迫切需要解决的问题。在利用微阵列技术。罢倚∈筇ジ巫橹再生肝组织和肝癌组织中特异表达而正常肝组织中不表达或几乎不表达的基因过程中发现,俏ㄒ环细帽泶锬J降挠〖基因,说明该基因可能存在特异性调控肝脏组织细胞生长的作用。所谓遗传印记,又称基因组己侵父菀糯畔⒌那状丛淳龆ǖ位基因中一个表达,而另一个“沉默”,即单等位表达R酝嗣嵌杂记基因的研究已表明:印记基因可以调控胚胎期部分组织的生长,在个体发育过程中发挥重要的协调作用;其表达的异常往往伴随着个体生长发育和行为的改变”’”。进一步的研究还表明:在一些肿瘤组织发生的过程中,可以检测到印记基因的异常表达,如印记基因胰岛素样生长因子蛟诙嘀种琢鲎橹中都有异常的高表达”’。另~个有趣的现象是:未被印记的癌基因或抑癌基因都呈双等位表达,因此往往需要两次打击,即两次突变,才能完全改变其表型变化,即肿瘤发生的“二次打击”学说。但印记基因参与肿瘤的过程则不符合该学说。受基因印记挠跋欤〖腔虺实サ任槐泶铮该特点决定其只需要一次突变,即可完成基因表型的完全改变,因此目前认为印记基因更易于发生表型变化,从而参与肿瘤的发生“‘⋯。结合以上研究,我们想到:虻谋泶镆斐S锌赡苁歉伟┳橹⑸拇俳蛩刂唬锌能作为蛑瘟菩碌姆肿影械恪A硗猓壳發临床上应用的肝癌标志物如谎以逄擒彰甃.,等的特异性和敏感性都有待进一步的华中科技大学同济医学院硕士学位论文甈
肝癌标志物和蛑瘟频耐堑姆肿影械闾峁┦笛橐谰荩提高“’。堑谝桓龇⑾值母伟┲懈弑泶锏挠〖腔颍蛴〖鞘蛊溆斜型改变的易感性,但其特异性和敏感性是否较传统的肝癌标志物更高,目前尚无相关研究。为验证我们的设想,本实验对不同肿瘤细胞系中虻谋达进行了检测,并探讨了肝癌组织中泶锏奶匾煨裕F渥魑G痹谛碌图河〖腔蚴疽馔华中科技大学同济医学院硕士学位论文
实验材料一、材料华中科技大学周济医学院赴辏河晌宜4娴南赴辏直鹞H烁伟┫赴闔、人胃癌细胞株⑷私岢Π┫赴闘⑷艘认侔┫赴關、人黑色素瘤细胞株、人馨土鱿赴闖橹瓯荆菏占靡皆航年经手术切除并经病理证实的例肝癌患者例,平均年龄岁母伟┳橹桶┡宰橹瓯尽夹愿尾』颊肝硬化陨砻庖咝愿尾例,肝血管瘤丙型肝炎I夭例巫橹瓯尽R陨媳瓯臼占蟊4嬗谝旱V校总崛∏耙惶旆湃胍姹浔赣谩杉H搜Q鵌荩杉比辗掷氲ジ龊讼赴尤隝河公司呀庀赴后于一冰箱保存。瓼庵苎5ジ龊讼赴掷胍汗河谔旖蚧约脸А甊抽提用及炕肈均为公司产品。甊媚孀B济窶猵公司产品,购于华为生物有限公司。甈用肝狹公