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14骆丹电子版copy2011424

光老化：在内源性老化的基础上加之环境因素（主要为紫外线辐射）的损害而发生的外源性老化，临床上表现为提前出现更加严重的老化表现。
PH
端粒与光老化
空白组1 测细胞内
氧化应激损伤
水平 ：MDA,
SOD及T-AOC
免疫荧光检测
细胞内氧化
光产物
8-oxo-dG
Real-Time
PCR检测端
粒的相对长
度：T/S
Western Blot
检测细胞老化
相关蛋白P53,
P21WAF-1及
P16INK-4a
药物组

对照组 8-MOP组
UVA组 8-MOP+UVA组
照光后24h、48h、72h及7d后8-MOP+UVA联合处理组SA-β-Gal
阳性细胞比例较对照组均明显增高（*P<），
且随时间积累而逐渐增高（r=)。
结论： 8-MOP+UVA联合作用可使皮肤FB出现光老化生物学特性改变
SA-β-Gal
电镜
2. 照光后2h各组细胞光产物8-oxo-dG8-羟基脱氧鸟嘌呤
对照组
UVA组
**
*
8-MOP+UVA组8-oxo-dG阳性
细胞核比例明显高于对照组（**P< ）；UVA组8-
oxo-dG阳性细胞核比例也明显高于对照组（*P< ）；
而8-MOP处理组较对照组无明显统计学差异（P> ）
3. GS-Rg1显著减缓端粒缩短
各组细胞于照光后第7日端粒长度比较
GS-Rg1各浓度干预组端粒相对长度（±）
明显长于8-MOP+UVA联合处理组（±，P<），
且各浓度组之间端粒相对长度与GS-Rg1浓度有明显的正相关，
表现出一定的剂量依赖性（P<）；高剂量组GS-Rg1干预组
端粒长度接近对照组水平，两者无明显统计学差异（P>）
*
*
*
4. GS-Rg1显著降低老化相关蛋白的表达水平
β-Actin
P53
P21WAF-1
P16INK-4a
照光后第7日老化相关蛋白表达水平
GS-Rg1各浓度干预组老化相关蛋白
P53, P21WAF-1 及 P16INK-4a的表达
水平明显低于8-MOP+UVA组
（P值均<），且各浓度组之间
蛋白表达水平与GS-Rg1药物浓度有
明显的负相关
(r1=，r2=，r3=)。
GS-Rg1预处理的人真皮成纤维细胞显示出较强的氧化应激耐受性，细胞内基因氧化产物8-oxo-dG产生明显减少；
GS-Rg1预处理的细胞端粒结构中相应碱基损伤较光老化模型组明显减弱，端粒结构稳定性加强，端粒缩短减缓；
GS-Rg1预处理的细胞由于端粒缩短减缓，其对老化检查点的激活受抑制，老化相关蛋白表达水平明显降低；
综上所述：GS-Rg1预处理可阻止基因损伤后对细胞老化P53检查点的激活，抑制其后细胞周期激酶抑制剂P21WAF-1 及 P16INK-4a的表达，减弱两者对细胞周期激酶CDK的抑制作用，使得CDK得以和核因子Rb蛋白结合，Rb蛋白磷酸后促进细胞生长周期相关基因进行转录，使得细胞恢复分裂活性。
讨 论
1、黄芩苷对UVA辐射后β-半乳糖苷酶阳性细胞比率的影响
黄芩苷对端粒缩短及光老化的影响
2. 黄芩苷对UVA辐射后细胞端粒长度的影响
3. 黄芩苷对UVA辐射后细胞p53、p16
和c-myc mRNA水平的影响
p53
p16
c-myc
4. 黄芩苷对UVA辐射后细胞p16和c-myc蛋白水平的影响
结 论
人参皂苷-Rg1可有效缓解细胞内氧化应激损伤，减少基因中光产物形成，减轻端粒损伤从而抑制端粒缩短，阻止端粒临界长度激活P53老化检查点，阻止细胞周期受抑的信号转导，降低老化相关蛋白表达水平，从而发挥显著的抗光老化作用
黄芩苷可有效保护人成纤维细胞免于氧化损伤和延缓光老化进程。其抗光老化机制包括延缓端粒缩短、调节老化相关基因包括p66、p53、p16、c-myc、MMP-1和TIMP-1表达有关，但黄芩苷对细胞端粒酶活性没有影响。
光疗临床改善光老化——
“Traditonal 激光磨削 ”(临床图片)
点阵激光（临床图片）
强脉冲激光 治疗光老化及保健嫩肤（临床图片）
空白2 UVA+IPL组 8-MOP/UVA +IPL
IPL对小鼠光老化皮肤的改善作用
空白组1 　UVA组