大丽轮枝菌蛋白激发子纯化、基因克隆与功能分析.pdf

中国农业科学院学位论文大丽轮枝菌蛋白激发子纯化、基因克隆与功能分析硕士研究生:王炳楠指导教师:邱德文研究员申请学位类别:理学硕士业:生物化学与分子生物学研究方向:蛋白质药物工程培养单位:植物保护研究所研究生院密级:论文编号:专提交日期年,.
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导师签名:。本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献研究生签名:本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定,即:中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。时阃:均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。
揪猩瓣\\\\\泼汔罕云郭妻罕中国肢业科学户彰,宁甲,“争心宣冢争莎目;移泄┮悼蒲г硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表大丽轮枝菌蛋白激发子纯化、基因克隆与功能分析生物化学与王炳楠专业研究方向工程植物保护研究所职称签名论文题目蛋白质药物论文作者分子生物学指导教师邱德文培养单位芯克硕姓名单位导师硕导口中国农业科学院植物植物病理学研究员博导√保护研究所王琦教授中国农业大学农学与生物技术学院答辩中国农业大学于嘉林分子生物学北京市农林科学院植裘季燕物保护环境保护研究张泽华害虫防治硕导√曾洪梅博导口刘峥副研究委会议记录厥论文答辩时间地点评何晨阳阅人主席农业昆虫与贝/口。
、诱导提高植物抗病性的功能。本文从大丽轮枝菌培养液中分离纯化出一种蛋白激发子,该激发子能引起烟草叶片过敏性反应,诱导烟草植物防卫物质的产生和积累;克隆并获得了激发子基因,成功实现了在大肠杆菌中的表达与纯化,用技术探究了该基因表达产物诱导烟草抗病相关基因的表达。本研究为进一步揭示激发子诱导植物系统获得性抗性及机制研究奠定了基础。昧蛩犸С恋怼蛋白纯化仪、非变性电泳、割胶电洗脱等方法,从大丽发酵液中分离纯化出一种蛋白激发子,经电泳检测为单一条带,相对分子量为,等电点为狿该蛋白激发子能够诱导烟草的过敏反应。鞍准し⒆覲能激发烟草抗病早期信号事件的发生镀琀幕郏赴幕钚匝爆发,产生,胞外质的碱化,的产生和积累灰鸱烙晕镏胼胝质,酚类和木质素牟突邸S盏佳滩菀镀谋奖彼峤獍泵、,增幅达到%;,烟草细胞膜通透性增加,细胞发生程序性死亡,细胞发生位⑶夜粜苑从Ρ昙腔騢挥盏急泶铩势譋疢觳獠⒔衐油凡庑颍竦酶眉し⒆拥鞍个可靠的肽段序列,在中肽段比对后发现,该蛋白激发子呛诎茁种白,其功能未知。设计特异性引物扩增出ū嗦牖蛐蛄,编码霭被岵⑶含有一个氨基酸残基的信号肽,理论分子量为.。将菇ㄔ趐靥上,转入大肠杆菌获得了重组表达蛋白。甈可以诱导烟草获得系统获得性抗性岣哐滩荻匝滩莼ㄒ恫《筕剐裕激发子诱导烟草植株后欤莅咭种坡蚀锏ィ豢莅叽笮∫种坡蚀锏ァ0攵结果显示,,,上调表达,并表现一定的时序性,说明盏佳滩菘共∠喙鼗蜃B妓缴系魇瞧溆盏枷低获得性抗性的重要机制之一。关键词:蛋白激发子,纯化,过敏反应,抗性反应,大丽轮枝菌轮枝菌。
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目录第一章引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯激发子的种类⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。.镌醇し⒆⒆雍突荡碳ぁ激发子诱导的植物防御反应⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。.⒆⒆⒆⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。本研究的目的意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯第二章大丽轮枝菌蛋白激发子分离纯化及理化性质鉴定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。.⒆