高效液相色谱-03.ppt

第七章液相色谱分析法
一、液相色谱固定相
stationary phase of HPLC
二、液相色谱流动相
mobile phase of HPLC
第三节液相色谱的固定相与流动相
high performance liquid chromatograph
stationary phase and mobile phase of HPLC
2017/8/16
一、液相色谱固定相 stationary phases of LC
(一). 液-液分配及离子对分离固定相
(1)全多孔型担体
由氧化硅、氧化铝、硅藻土等制成的多孔球体;早期采用100μm的大颗粒,表面涂渍固定液,性能不佳已不多见;
现采用10μm以下的小颗粒,化学键合制备柱填料;
(2)表面多孔型担体
(薄壳型微珠担体)
30~40μm的玻璃微球,表面附着一层厚度为1 ~ 2μm的多孔硅胶。
表面积小,柱容量底;
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(3)化学键合固定相
化学键合固定相: 目前应用最广、性能最佳的固定相;
a. 硅氧碳键型: ≡Si—O—C
b. 硅氧硅碳键型:≡Si—O—Si — C
稳定,耐水、耐光、耐有机溶剂,应用最广;
c. 硅碳键型: ≡Si—C
d. 硅氮键型: ≡Si—N
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用化学反应的方法将固定液的官能团键合在载体(硅胶)表面上,所形成的固定相,称为化学键合相。具有分配和吸附作用。优点:
①使用过程不易流失;
②化学性质稳定,在pH2~8的溶液不变质;
③热稳定性好,一般在70℃以下稳定;
④载样量大,比硅胶高约一个数量级;
⑤适于作梯度洗脱。
化学键合相
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化学键合相一般用硅胶作载体,具有分配作用和一定的吸附作用。吸附作用的大小视键合覆盖率而定。用化学反应方法将载体表面上残存的硅醇基除去,称为封尾(封顶或遮盖),所形成的键合相称为封尾键合相,完全封尾的键合相无吸附作用,缺点是疏水强。
按极性分类:非极性、中等极性、极性键合相3类
化学键合相
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化学键合相
1. 非极性键合相:十八烷基硅烷键合相(ODS)是最常用的非极性键合相。
2. 中等极性键合相:常见的有醚基键合相。
3. 极性键合相:强极性-氨基键合相(分析糖类);中强极性-氰基键合相。
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(二).液-固吸附分离固定相
种类:硅胶、氧化铝、分子筛、聚酰胺等;
结构类型:全多孔型和薄壳型;
粒度:5~10 μm;
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⑴无定形多孔硅胶,国产代号YWG,dp5~10μm
⑵球形全多孔硅胶,国产代号YQG ,dp3~10μm
⑶堆积硅珠,国产代号YQG ,dp3~5μm

⑴球形(5~10μm);⑵无定形(5~10μm)。
(有机胶)
⑴国产YSG系列;⑵日立3010胶等。

⑴分子筛;⑵聚酰胺等。
液-固色谱固定相
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(三).离子交换色谱分离固定相
结构类别:
(1)薄壳型离子交换树脂
薄壳玻璃珠为担体,表面涂约1%的离子交换树脂;
(2)离子交换键合固定相
薄壳键合型;微粒硅胶键合型(键合离子交换基团)
树脂类别:
(1) 阳离子交换树脂(强酸性、弱酸性)
(2) 阴离子交换树脂(强碱性、弱碱性)
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(四). 空间排阻分离固定相
(1)软质凝胶
葡聚糖凝胶、琼脂凝胶等。多孔网状结构;
水为流动相。适用于常压排阻分离。
(2)半硬质凝胶
苯乙烯-二乙烯基苯交联共聚物,有机凝胶;
非极性有机溶剂为流动相,不能用丙酮、乙醇等极性溶剂
(3)硬质凝胶
多孔硅胶、多孔玻珠等;
化学稳定性、热稳定性好、机械强度大,流动相性质影响小,可在较高流速下使用。
可控孔径玻璃微球,具有恒定孔径和窄粒度分布。
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