观察根尖分生组织细胞的有丝分裂
袁兰兰曾姗张宁钟可
一、实验目的
2. 观察植物细胞有丝裂的过程,识别有丝分裂的不同时期,比较细胞周期不同时期的时间长短。
二、实验原理
,有丝分裂常见根尖、茎尖等分生区细胞。由于各个细胞的分裂是独立的,因此在同一分生组织中可以看到处于不同分裂时期的细胞。通过在显微镜下观察各个时期细胞内染色体(染色质)的存在状态,判断这些细胞各处于有丝分裂的的哪个时期(间期、前期、中期、后期和末期)。
2、碱性染料(龙胆紫溶液或醋酸洋红液)能将染色体(或染色质)染成深色。
3、盐酸使植物细胞之间的果胶质层松散,用盐酸处理植物的根尖,可以使根尖细胞彼此容易分离。
三、实验用具
1. 大蒜根尖(因为根尖生长点属于分生组织,细胞分裂能力强,易观察到有丝分裂各个时期的细胞) 、洋葱根尖固定标本
2. 显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、滴管、吸水纸、培养皿
3、解离固定液:15%盐酸和95%酒精混合液(1:1)
4、(或2%醋酸洋红液)
四、实验步骤
1. 根尖的培养:实验前3—4天,把大蒜放在托盘中,让底部侵入清水中。把整个装置放在温暖的地方培养。(不可将大蒜完全浸没,培养时要每天换水)
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待根长到 5cm左右时,取生长健壮的根 2—3mm
3、装片的制作(解离漂洗染色制片)
解离
剪取大蒜根尖2-3mm,立即放入盐酸和酒精混合液中(1:1)的培养皿中,在温室下解离,3~5min
使植物细胞之间的果胶质层松散,细胞相互分离
漂洗
用镊子取出,放入清水的培养皿中漂洗约10min
洗去盐酸,便于碱性染料染色
染色
把根尖放入盛有龙胆紫溶液或醋酸洋红等碱性染料的培养皿中,染色3~5min
使染色体着色,便于显微镜下观察
制片
将根尖取出,放在载玻片上,加一滴清水,并用镊子尖把根尖弄碎,盖上盖玻片,在盖玻片上盖2~3层吸水纸,用拇指轻压,或用铅笔的橡皮端或玻璃滴管上的橡皮头,对准盖玻片下的材料在盖玻片上轻轻敲击,使根尖细胞均匀扩散成淡淡的云雾状。
使细胞分散开,有利于观察
(1)将装片先用低倍镜观察,找到分生区细胞:细胞呈正方形,排列紧密。
(2)再换成高倍镜仔细观察,首先找出分裂中期细胞,然后再找前期、后期、末期的细胞,注意观察各时期内染色体形态和分布的特点。最后观察分裂间期的细胞。
(3)如果自制标本不太理想,可以观察洋葱根尖固定标本。
4. 显微镜观察:
(4)调节显微镜的放大倍数,你能够在视野统计里同时看到约50个细胞,仔细统计各个时期的细胞数,并记录好数据。
想一想,为何各个时期细胞的数量不一样?
5. 镜检结果分析
进行有丝分裂的细胞分裂相
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