使用全自动免疫组化机体会.doc

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使用全自动免疫组化机领会
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使用全自动免疫组化机领会
使用全自动免疫组化机的领悟
纲领:免疫组化在病理诊疗中起着特别重要的作用。免疫组化技术在肿瘤分类、诊疗、预后判断方面宽泛应用。随着全自动免疫组化机宽泛应用,作者把使用了一段时间全自动免疫组化仪后的领悟与大家商议。本文经过对免疫组化技术的原理的商议,分析了全自动免疫组化机在应用中注意事项及优点,进而商议其应付举措。
重点词:免疫组化技术;全自动免疫组化染色机
免疫组织化学染色技术是病理技术中的一项重要染色方法,固免疫组织化学染色技术在目前病理诊疗中起着特别重要的协助作用,病理医师在好多情况下需要借助免疫组化来明确病变的性质、种类以及累及范围等。免疫组化技术的应用,为有关肿瘤组织抗原的治疗以及预后供了重要的依据。但是,在目前全自动免疫组化仪宽泛应用的同时,也陪同着一些注意事项及优点。下面从免疫组化染色原理来商议以下几点注意事项及优点。
免疫组化染色技术的原理
免疫组化染色技术是经过抗体结合特别抗原用DAB显
色及苏木素复染的染色技术。这些抗体抗原的相互结合经常
是以与这抗体相结合的酶元素来进行显示。主假如因为没有
着色物质的特点,抗原与抗体的结合使得一些有色物质在抗
-抗原相结合的地址进行积淀。酶积淀的物质主要包括蛋白质、多肽、激素、病原体等,用光学显微镜才能看到。目前使用甲醛固定促进了蛋白的交和凝结,使蛋白质的构造发生了变化,但抗衡原决定镞的构造(苯环)不会产生影响。在使用蛋白酶进行消化后,将抗原决定镞中的一些杂蛋白行清
除,进而使其翻开交联,在经过使用微波和高压锅等热抗原的修复工,使抗原决定镞发生最大程度的裸露。进而提升免疫组化染色的敏感性[1]。
全自动免疫组化仪染色中注意以下几个问题
,在滴加一抗时的量,一般在100ul(2~
滴)。
~6h为宜,最长不高出24h,过长很短都会对染色结果产生不良影响。因组
织固准时间过长会关闭或损坏组织的抗原活性,而固准时间
很短则抗原弥散和组织构造不清楚。目前一般都用中性福尔
马林固定,其组织蜡块中心出现凹陷现象,且凹陷处组织变
软,不易切全。固定欠佳的组织免疫组化染色经常失真,某
些较纤弱的抗原(如Ki-67等核抗原)易抛弃,而细胞间的
裂隙形成也简单造成膜抗原的假阳性。,
冷冻过的组织经过老例固定,白腊包埋后,原则上是能够用
于免疫组化检测,但冷冻过程有可能造成抗原的构造发生变
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化,所以在必然程度上可能会影响到某些抗原的检测收效。

要求,切片晌要做到平展和厚薄适中,以4~6um为宜,避
免出现皱褶,气泡。为防备脱片对染色结果的影响,需染色
前对玻片进行办理。最好使用配套的涂胶玻片,目前常用的
是用APEs与多聚赖氨酸(Poly~L~Lysine)制成的涂胶玻
片,其防脱收效较为满意;因免疫组化修复时需要高温,固
选择洁净的涂胶切片,如涂胶不均匀或切片不洁净,在封盖
缓冲液上滴加一抗会出现水纹状,不会宽泛覆盖组织上,固
出现组织上斑块状着色。
,去除污垢,防备加
热片加热不均匀,检查废液管可否畅达,防备(苏木苏杂质
及零散的组织拥挤管道)排液不畅致使夜间机器自动停止,
检查试剂桶与仪器的连结可否严实[2]。
3全自动免疫组化仪的优点[2]
采用全自动免疫组化染色仪进行免疫组化制片的有点,
拥有以下的优点:①工作效率提升。全自动免疫组化染色机
经过程序预设,可从脱蜡、抗原修复、滴加一抗、DAB显色
直至复染自动满意运行;②免疫组化操作标准化。在Ventnaa
BenchMarkGX全自动染色机上,实验步骤均由电脑程序控
制。机器自己带有吹气与液体封盖膜混匀过程,已保证切片
的染色均匀性,防备边缘不着色;液体封盖膜保护了滴加一
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抗后孵育时的温度及抗原修复;每一步后都要冲洗减少了切
片的非特异性着色[3];③免疫组织化学试剂的标准化,全
自动免疫组化机所有使用的试剂包括苏木素、DAB显色液、
冲洗缓冲液、油性封盖膜、修复液、脱蜡液,都由Ventnaa
企业生产,并进行严格的质量检测。保证每批试剂的牢固性
;④便于玻片归档,自动打号机,标签不退色;⑤安全环保,配有废液回收系统,可会集办理废液;⑥全自动免疫组化仪有完满的质控记录,每张玻片都有详尽的实验过程,可查察实验时间,试剂的批次和效期。关于已经过期的试剂,仪器会自动发出警报,防备过期试剂造成的实验误差;⑦方便科室的库存管理,能够快速查察到库存清单,实时订购试剂。
全自动免疫组化机从质量、速度、牢固性等诸多方面,实现了病理检查结果的标准化,可随时开机进行实验,自己分派时间,机器运行大概2h左右能够达成一批,既加快了实验步骤,又减少了手工工作的繁琐,并使免疫组化染色标准化,实验步骤省力又省时,更为快速病理报告的发出,更
好的为临床服务。VentnaaBenchMarkGX全自动免疫组化染色仪备有废液桶,可将实验步骤所产生的废液由有资质的公
司会集回收。为临床病理诊疗供应有力依据和可靠保证,为
病理实验室与国际标准化发展接轨起到重要作用[4]。
参照文件:
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罗玉凤,[J].诊疗病理学
杂志,2012,19(4):31.
余琦,李宁,杨江辉,[J].局部手术学杂志,2010,19(2):83-85.
杨月红,袁静萍,袁修学,
领悟[J].临床与实验病理学杂志,
2011,27(3):333-334.
余琦,李宁,杨江辉,[J].局部手术学杂志,2010,19(2):83-85.
编写/冯焱
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