白眉蝮蛇蛇毒磷脂酶A2的神经毒活性探究.pdf

大连理工大学
硕士学位论文
白眉蝮蛇蛇毒磷脂酶A<,2>的神经毒活性研究
姓名:张煜
申请学位级别:硕士
专业:生物化学与分子生物学
指导教师:包永明
20080605
摘要用阳离子交换和凝胶过滤层析,从长白山白眉蝮蛇癵/剂量下,,对神经肌肉信号传导收缩的抑制作用位点在突触前膜。甈孕∈:肌酸激酶活性检测表明,,随着浓度增长肌酸激酶活性电流的影响,结果表明:.%;同时促进钠通道开放,增加钠电流峰值到ィ飨越档通过神经细胞电压依赖型离子通道阻滞传递神经信号的动作电位产生,研究结果证实关键词:甈痪倍辜。簧窬拘裕焕胱油ǖ叨局蟹掷得到磷脂酶,,质谱检测分子量为;该蛋白位氨基酸残基为狦.,具有肌肉毒性,神经毒性,但缺乏磷脂酶活性。甈芄患亮恳览敌缘匾种凭倍辜∩窬藕耪4ǖ疾⒂跋旒∪馐账酰浓度的降低,肌肉收缩幅度的抑制效率也逐渐降低;实验证明甈酝淮ズ竽能浓度依赖性的抑笞巧窬春隙鞯缥环群痛ǖ妓俣龋趌“/剂量下,甈谧饔种雍笸耆种谱巧窬瓯径鞯缥挥氪ǖ妓俣韧笔蛊渖窬传导活性消失。逐渐增加;同时染色切片标本观察显示籔/浓度时,,分析甈窬拘远源笫蠛B砩窬O赴砻胬胱油ǖ神经细胞兴奋性。综上所述,甈鹕窬赴缧朔苄越档停窬橹藕糯ǖ急幻飨砸种疲甈且恢中碌耐淮デ吧窬舅亍大连理工大学硕士学位论文
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独创性说明作者郑重声明:本硕士学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果,也不包含为获得大连理工大学或者其他单位的学位或证书所使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的贡献均已在论文中做了明确的说明并表示了谢意。作者签名:
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言引生物源毒素可以由动物、植物、细菌、海洋生物产生,.包括蛋白质、肽、非蛋白质缟锛睢⒕勖训类等物质,很多生物源毒素具有临床治疗药物的作用。其中很多生物源毒素具有很强的神经毒性,对神经传导均产生不同机制的阻断作用,可用于神经蛇毒作为一种生物源毒素是蛇的毒腺分泌的多种组分构成的复杂的混合物。含有多种蛋白质、多肽、酶类和其它小分子物质,具有广泛的生物学活性。从二十世纪开始,人们就开始了对蛇毒在治疗疾病和控制疼痛方面的直接研究。和在年发现眼镜蛇毒液的稀释液有镇痛作用。。之后,其它含有神经毒素的蛇毒也先后被发现具有镇痛作用,人们从蛇毒中分离出神经毒素琋作为镇痛药物。随着蛇毒毒理学、药物学、生物化学和分子生物学的发展,蛇毒的许多组分已得到分离纯化。美国径匝劬瞪叽侄窘谐醪椒掷耄竦蒙窬舅刈榉郑瞥和街种萍粒糜谥瘟仆绻绦蕴弁础⒍裥灾琢鎏弁春凸亟谕础U饬N夜昶穑U苟蛇毒的镇痛作用研究,开发了蛇毒粗毒制剂和蛇毒神经毒素制剂,用于临床治疗疼痛;其中以中科院昆明动物研究所研制的眼镜蛇毒神经毒素制剂一克痛灵为代表,主要治疗坐骨神经痛、三叉神经痛、神经血管性头痛以及风湿痛等顽固性疼痛,临床疗效显著。世界毒蛇资源丰富,大约种,能致人以死命的毒蛇约嘀郑直鹆ナ于海蛇科、眼镜蛇科、蝰蛇科万笊呖目前蛇神经毒素的研究报道大量是眼镜蛇科和海蛇科的蛇毒,其它科毒蛇的某些种含该毒素研究也有报道。近年来,随着生化技术的发展及分子生物学等方法的应用,大量的神经毒素已经得到分离纯化鐾淮ズ笊窬舅鼐陀多种械囊丫辛税被酸序列分析。蛇神经毒素的空间结构的研究也正在开展之中,许多种神经毒素已通过衍射和核磁共振方法测定了其空间结构。部分蛇神经毒素的镇痛机制也基本上得到阐明壳叭杂卸嘀稚呱窬舅赜写徊教剿餮芯。随着分离纯化技术和镇痛药物筛选技术的进步,从众多种类蛇毒中筛选出更多种的纯的神经毒及其它非成瘾性镇痛成分成蛇毒神经毒素的镇痛作用与阿片类药物如吗啡相比,具有作用持久,连续应用无耐受及成瘾,而且不良反应少等优点,是一种很有潜力的新型镇痛