大团囊虫草菌发酵菌丝类雌激素活性分析.pdf

龙学位论文作者签名:专手蓼矽勋学位论文作者签名:竹物物牟学位论文版权使用授权书咿过的研究成果,也不包含为获得逝江太堂或其他教育机构的学位或证书而使用过本学位论文作者完全了解逝江太堂有权保留并向国家有关部门或机构送交本论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权逝江太堂可以将学签字日期:扫汐年仁月为日沁D阥禄萌,口目研究的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。签字日期:位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。C艿难宦畚脑诮饷芎笫视帽臼谌ㄊ导师签名:签字日期:己谀阬撰写~卜垆护
删疘摘要\大团囊虫草是民间用于治疗血崩、月经不调等症的一类虫草菌。野生资源的匮乏使得它的研究长期受到阻滞。本论文通过液体发酵工艺解决资源匮乏的难题,对其发酵菌丝进行了全面的活性组分和动物药效实验,揭示了其药效物质基础并对其类雌激素活性作用机理进行了研究。首先,采用形态学与分子生物许特征对采集到的菌株进行,确证属于大团囊虫草种。菌种保存在中国专利局指定的保藏单位中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保存编号为:1臼笛槭乙鸦竦霉曳⒚髯ɡ釉赐飞媳;ふ庖幌」笠┯米试础通过其野生生长环境的分析和其他虫草类真菌生长条件的资料借鉴,利用多种统计学手段,建立大团囊虫草菌发酵工艺。较优小试发酵工艺为:培养基蔗糖~、蛋白水解液~;:,转速;针对其中多糖、多酚类以及虫草酸的产量进行了进一步的发酵工艺优化,最终得到了有利于此三者产量的优化工艺:培养基为葡萄糖~,酵母粉·ǎ嫌妓解液/藁卫胱游A姿岫饽.·土姿崆舛豋.·ǎ鹗紁为,温度为徊⒃谛∈越峁∩铣晒ν瓿纱郕吨发酵放大的研究。优化条件也确证了从野生到人工培养的过程中,对天然生长环境的分析至关重要。并为下一步的活性成分分析和作用机理研究提供了基础。初步药理药效实验表明菌丝具有较弱的雌激素活性。急性毒副反应未明显显示。采取中压液相、高效液相色谱等分离手段对发酵菌丝主要活性组分进行分离结果表明其内主要活性组分含量分别为虫草多糖./⒍喾永/突仆@嗪/删邸Q芯勘砻鞣⒔途烤哂杏胄矶喑娌堇嗵烊缓头⒔途肯类似的活性成分,特别是多酚类黄酮类含量丰富,人工培养的大团囊虫草菌丝不但安全且具有丰富活性成分。本论文利用细胞增殖率实验研究了大团囊虫草提取物对雌激素受体阳性和~、酵母粉·、纯化。/⒊娌菟./⒆艿鞍/⑾
关键词阴性两株乳腺癌细胞的生长影响。结果发现提取物能够促进雌激素受体阳性的乳腺癌细胞,对雌激素受体阴性的甅乳腺癌细胞生长几乎没有影响,暗示了我们提取物通过雌激素受体起作用。利用荧光素酶报告基因甌柿5墓菇ǎ徊浇沂玖颂崛∥镌诮氲较赴竽芄皇沟肊基因转录起始,其作用与雌二醇类似但弱于雌二醇,并且和雌二醇有一定的竞争关系。通过实时定量腿旧拭庖吖渤恋淼姆椒ń凶饔猛揪兜奶剿鳎芯表明发酵菌丝提取物与结合之后能够激活,琾的转录,在宏观上表现为类雌激素的活性。对浸提物的抗氧化活性研究发现,对自由基的清除率达ヒ陨希贼腔杂苫统踝杂苫那宄室簿艽锏接牍系抗氧化药品效果相当。大团囊虫草发酵菌丝的类雌激素活性作用途径研究尽管显示出类似于旱幕钚裕涓春闲偷淖饔靡舶凳玖似淇赡艽嬖诙嗤ǖ蓝喟械愕作用方式,接近于植物雌激素的选择性作用,安全有效的特点使其很可能成为一种具有雌激素替代治疗效用的潜在药物。综上所述,本论文建立了稀有名贵药用真菌大团囊虫草发酵工艺,解决野生资源匮乏的问题;解析其发酵菌丝活性组分并探索药理学效果其作用机理。研究成果为分析药用真菌的物质基础与作用机制提供了思路和方法,对我国药用真菌资源的开发具有重要意义。大团囊虫草菌;发酵优化;组分分析;雌激素活性;多酚类;黄酮类Ⅱ
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摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..目录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.第滦髀邸第麓笸拍页娌菥募ê头⒔陀呕第麓笸拍页娌莘⒔途恳┬Ъ白榉址治觥弓浴璴虫草属药用真菌的研究现状⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⒔⑾肿础萍に刈饔没砗透昶谧酆现ⅰ.〉牟∫虿』.萍に靥娲瘟坪透昶谧酆现ⅰ.参锎萍に亍本论文的主要研究内容和意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯