实习二红细胞、网织红细胞检测.ppt

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第一页,共三十三页。
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目的(mùdì)和要求
熟悉正常红细胞和网织红细胞的形态学特点
掌握(zhǎngwò)血红蛋白测定方法、参考值和临床意义
掌握血细胞多参数报告单的正常值及其增减的临床意义
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红细胞计数(jìshù)(redbloodcellcount)
红细胞计数是取一定微量血液,经稀释后计算出血液内所含红细胞数目
原理(yuánlǐ):用等渗稀释液将全血稀释至一定倍数,充入血细胞计数池,在光学显微镜下计数一定体积内的红细胞数,经换算求出每升血液中的红细胞数量
方法:显微镜计数法
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器材(qìcái)及试剂:
取血吸管,一次性定量(dìngliàng)采血管(20ul)
计数板:是一块厚玻璃制成,板上刻度分为9个大方格面积为Imm2。中央大方格用于红细胞计数,被双线等分成25个中方格,每个中方格又划分为16个小方格。计数板与盖玻片组成计数池,
显微镜、盖玻片、刺血针、棉花等
小试管、刻度吸管、红细胞稀释液。
其它:75%酒精棉球及干棉球
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操作(cāozuò):
取血:
选择耳垂边缘或指端,先用75%酒精(jiǔjīng)棉球消毒局部皮肤。等待干后,用消毒后的刺血针刺入皮肤,深约2毫米。待血液从针孔流出,用于棉花擦去第一滴血
轻轻挤压,使血液流出形成绿豆大小的血滴。操作者用右手平拿取血吸管尖端浸入血滴中,缓缓吸血恰至“10”刻度处为止。然后用干棉花擦净吸管外沾附的血液
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稀释及混匀
先准备一清洁小试管,,备用
将取好的血液立即挤入上述试管中,并来回吸取小量稀释液数次,以便将残余在吸管中的血液全部(quánbù)洗净
摇动试管,充分混匀。此时血液被稀释200倍
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充池
先将计数板及盖玻片擦干净,并将盖玻片复盖于计数池上面。
用吸管吸取己充分混匀的稀释血液一滴,滴于盖玻片的下方边缘处,稀释血液即充填入计数池中。注意勿发生(fāshēng)气泡或使稀释血液流入计数池旁小槽内
静置2-3分钟,待红细胞完全下沉稳定后进行计数
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计数
平放计数板于显微镜台上,先用低倍镜找到计数池的中央大方格。观察红细胞是否均匀,并调整至视野中间(zhōngjiān)。
再转换高倍镜计数。镜下红细胞为圆形或盘形、略带黄色的细胞。如将上侧线和左侧线上的红细胞都计数在内,则不要再将下侧和右侧线上的细胞计入。计数时必须按一定方向和顺序,以免将红细胞重复计数或漏数。
计数5个中方格(即四角的及中央的中方格)由红细胞总共的个数,将其结果乘以10。即得每立方毫米血液中所含红细胞数目,再乘以10。即得每升血液中所含红细胞数目。
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每升血液中红细胞数目=五个中方格内红细胞个数×5()×10(变为1u1)×106(变为1L)×200(稀释倍数)=五个中方格内红细胞个数×1010
清洁仪器:
计数后,将盖玻片及计数板用水冲洗干净,再用绸或细布擦干
吸管先用蒸馏水,继用95%酒精(jiǔjīng),后用乙醚洗涤干净,保存备用
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注意事项
不能在有水肿、炎症、淤血等部位或刺血过浅处采血
所用吸管、试管、滴管及血细胞计数板须干净无水
操作迅速,充池一次完成,不能有气泡
红细胞分布不均,每个中方格(fānɡɡé)之间相差大于20个时要重新充池计数
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