RD 人抗甲状腺球蛋白抗体(ATGA TGAB)中文说明书 100ng.doc

RD 人抗甲状腺球蛋白抗体(ATGA TGAB)中文说明书 100ng
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断。
人抗甲状腺球蛋白抗体(ATGA/TGAB)定量检测试剂盒(ELISA)
使用说明书
【试剂盒名称】
人抗甲状腺球蛋白抗体(ATGA/TGAB)定量检测试剂盒(ELISA) 【试剂盒用途】
定量检测人血清、血浆及相关液体样本中抗甲状腺球蛋白抗体(ATGA/TGAB)的含量。【检测原理】
本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。将标准品、待测样本加入到预先包被人抗甲状腺球蛋白抗体(ATGA/TGAB)多克隆抗体透明酶标包被板中,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分,再加入酶标工作液,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根过氧化物酶(HRP)催化下转化为蓝色产物,在酸的作用下变成黄色,颜色的深浅与样品中人抗甲状腺球蛋白抗体(ATGA/TGAB)浓度呈正相关,450nm波长下测定OD值,根据标准品和样品的OD值,计算样本中人抗甲状腺球蛋白抗体(ATGA/TGAB)含量。【试剂盒组成】
备注:标准品用标准品稀释液依次稀释为:100、50、25、、、
【需要而未提供的试剂和器材】 1、37℃恒温箱
2、标准规格酶标仪
3、精密移液器及一次性吸头 4、蒸馏水
5、一次性试管 6、吸水纸【操作步骤】
1、准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡30分钟。 2、配液:用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。
3、加标准品和待测样本:取足够数量的酶标包被板,固定于框架上,分别设置标准品孔、
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待测样本孔和空白对照孔,记录各孔位置,在标准品孔中加入标准品50μL;待测样本孔中先加入待测样本10μL,再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍);空白对照孔不加。
4、温育:37℃水浴锅或恒温箱温育30min。
5、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。
6、加酶标工作液:每孔加入酶标工作液50μL,空白对照孔不加。
7、温育:重复4的操作。
8、洗板:重复5的操作。
9、显色:每孔先加入显色剂A 液50μL,再加入显色剂B液 50μL,37℃避光显色15min。
10、终止:取出酶标板,每孔加终止液50μL,终止反应(颜色由蓝色立转黄色)。
11、测定:以空白孔调零,在终止后15分钟内,用450nm波长测量各孔的吸光值(OD值)。
12、计算:根据标准品的浓度及对应的OD值,计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样本的OD值,在回归方程上计算出对应的样品浓度,也可以使用各种应用软件来计算。最终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。
【样本要求】
1、样本不能含叠氮钠(NaN3),因为叠氮钠(NaN3)是辣根过氧化物酶(HRP)的抑制剂。
2、标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验