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《实验诊断学》红细胞与白细胞数量测定实验
《实验诊断学》实验报告
实验一红细胞计数、白细胞计数
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专业年级:
学号:
姓名: 实验日期:
2015
一. 实验原理

用等渗稀释液将血液稀释一定倍数,充入计数池中,于显微镜下计数一定体积内的红细胞数,经过换算求得每升血液中的红细胞数量。

血液经白细胞稀释液稀释,成熟红细胞全被溶解,在显微镜下计数一定体积内白细胞数,换算出每升血液中白细胞数量。
二. 实验内容与步骤

改良Neubauer计数板、显微镜、盖玻片、试管、微量吸管、移液管、洗耳球、生理盐水、RBC稀释液、WBC稀释液(冰乙酸3ml、蒸馏97ml、10g/L亚甲蓝溶液3滴混合过滤后备用)

(1)红细胞计数
1、,放入一小试管内。
2、用微量吸管吸至l0ul处。
3、擦去管尖外部余血将血液迅速轻轻吹入盛有红细胞稀释液的试管内, 上清液嗽洗吸管2-3次,立即摇匀。
4、将计数池与盖玻片用软布料擦净,将盖玻片覆盖于计数池上。
5、用吸管吸取混匀的红细胞悬液,充入计数池中。
6、待3~5分钟,让红细胞完全下沉后,将计数板平放在显微镜台上,用低倍镜观察,如红细胞分布均匀即可换高倍镜进行计数。
红细胞计数的区域: 中心大方格中的5个中方格(正中一个和四角各一个)。计数原则: 数上不数下,数左不数右的计数原则即凡压在中方格边线(双线)上的红细胞,只计上侧与左侧线上的细胞,而压在下侧与右侧线上者不计入。
计算方式:
RBC/L=5个中方格内RBC数×5×10×200×106
=5个中方格内RBC数/100×1012
参考值:
男性:(~)×1012/L
女性:(~)×1012/L
新生儿:(~)×1012/L
(2)白细胞计数
1、取小试管一支,。
2、用微量吸管准确吸收末梢血20ul,擦去管外余血,将吸管插入试管中稀释液底部,轻轻将血液放出,并吸取上清液清洗吸管两次,混匀。
3、待红细胞完全破坏,液体变为棕褐色后,再次混匀后充池,静置2~3min,待白细胞下沉。
4、用低倍镜计数四角4个大方格内的白细胞数,对压线细胞按“数上不数下、数左不数右”的原则进行计数。
计算方式:
WBC/L=(4个大方格内WBC数/4) ×10×20×106
=(4个大方格内WBC数/20)×109
参考区间:
成年男性:(~)×109/L
成年女性:(~ )×109/L
儿童:(8~10)×109/L
婴儿:(11~12)×109/L
新生儿:20×109/L
三. 实验结果
红细胞计数实验结果如下图:
左上角方格
右下角方格右上角方格左下角方格
正中方格
表一红细胞分类计数表
左上角方格
42
RBC/L=5个中方格内RBC数×5×10×200×106
=5个中方格内RBC数/100×1012
=(42+130+224+84+80)/100×1012
=×1012