华中农业大学
硕士学位论文
动物源性食品中氯霉素快速检测的ELISA方法研究
姓名:杨丽丽
申请学位级别:硕士
专业:微生物学
指导教师:高志贤
20090601
摘要氯霉素且恢指咝У目股兀梢院痛蠖嗍┪锖退橇咸砑蛹粱煊茫在使用过程中稳定,药效不会降低。由于该药物的广泛使用,使其在动物源性食品中的检出率越来越高,许多发达国家相继禁止或严格限制使用氯霉素,但传统的氯霉素残留分析方法需要昂贵的仪器和专业技术人员,且周期长、成本高,不能满足现场和快速检测的要求,建立高效、灵敏、经济的氯霉素残留分析方法是很有必要的。因此,研究用于检测氯霉素的约梁杏糜谑称钒踩ḿ觳猓杂诒;は本研究对氯霉素人工抗原的合成、抗体的纯化以及觳夥椒ǖ慕⒑陀化等进行了研究。采用活性酯法和重氮化法,将半抗原氯霉素与小牛血清白蛋和卵清白蛋白剂#贤夤馄住⒑。,采集抗血清,制备出氯霉素多克隆抗体,经ú舛ǹ固逍Ъ劭纱锏:。采用饱和硫酸铵分级沉淀法对采集的抗血清进行初级分离,后利用自制的免疫亲和层析柱对制方徊进行亲和层析纯化,可获得高纯度高特异性的兔抗氯霉素抗体。通过比较不同的酶标记方法,选用混合酸酐法合成酶标半抗原,并用确定了偶联后幕钚浴Mü园换撼逡骸⑾吹哟问晃露取⑹奔洹⒓跎非特异性吸附的方法等的筛选,。确定以/的撼逡鹤魑0幻副臧宓目固逑∈突撼逡海芤鹤魑C副昕乖南∈。通过方阵试验及筛选得到优化浓度组合为:抗体./、酶标半抗原豨/。氯霉素在—/浓度范围内,抑制率与浓度呈线性关系,回其他类抗生素无明显的交叉反应。者利益,以及在国际贸易中有重要的意义。闭液,固相包被条件为℃最佳。归方程为一..琑琁痬琁/。与/动物源性食品中氯霉素快速检测的椒ㄑ芯
试剂盒可用于样品中氯霉素的快速检测。,变异系数在ィブ洹J约梁行阅懿馐越峁砻鳎渥既沸院椭叵中较好,储存期试验表明试剂盒在下可保存鲈隆?捎糜谙喝猓θ猓D痰样品中氯霉素残留的批量快速,廉价的检测。关键词:氯霉素;多克隆抗体;酶联免疫吸附分析;残留;试剂盒;酶标抗原实验中确定了对鸡肉,牛奶和新鲜虾肉中氯霉素的提取方法,据此构建的华中农业大学专业学位硕十学位论文
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导师签名:唔埂研究生签名..即确翻学位论文作者签名:抑两翻签名日期:枷暌自屡H时间:硼晟嘣屡H签名日期:砂口月,日华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书如需保密,解密时间年独创性声明学位论文使用授权书月日本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得华中农业大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料,指导教师对此进行了审定。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明,并表示了谢意。本人完全了解华中农业大学关于保存、使用学位论文的规定,即学生必须按照学校要求提交学位论文的印刷本和电子版本;学校有权保存提交论文的印刷版和电子版,论文。本人同意华中农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容,同时本人保留在其他媒体发表论文的权力。注:保密学位论文∩婕凹际趺孛堋⑸桃得孛芑蛏昵胱ɡ惹痹谛枰L峤槐C艿穆并提供目录检索和阅览服务,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位文诮饷芎笫视糜诒臼谌ㄊ椤学位论文是否保密注:请将本表真接装订在学位论文的扉页和目录之闻
。具有对革兰氏阳性、阴性细菌均有抑制作用的广谱抗菌谱性质,广泛用于沙门氏菌、嗜血杆菌、肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、衣原体、支原体等感染的治疗髯杂ⅲ。氯霉素,
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