小麦粉 破损 淀粉α-淀粉酶法.doc

G_0384小麦粉破损淀粉α-淀粉酶法
G_0384
小麦粉破损淀粉测定法α-淀粉酶法

本方法适用于小麦粉破损淀粉值的测定。

小麦粉中破损淀粉对α-淀粉酶的敏感性大大高于未破损淀粉,在常温下能被α-淀粉酶降解生成糊精和一定量的还原糖。利用此特性,在规定的条件下,用α-淀粉酶降解小麦粉中破损淀粉,再用铁氰化钾法测定其还原糖量,并根据法兰德的经验公式计算小麦粉中的破损淀粉值。


以下试剂未经标明的均为分析纯试剂,水为蒸馏水;
缓冲溶液
,加入3mL冰乙酸,再用水稀释至1000mL,±;
提取溶液
,再稀择至1000mL;
α-淀粉酶液
称取活性相当于15000±1500A的α-淀粉酶制剂溶于500mL提取液中,再加入500mL缓冲液,α-淀粉酶活性测定见附录A(补充件)α-淀粉酶活性测定。此溶液用时现配;
10%(V/V)硫酸溶液;
12%钨酸钠溶液;

000mL水中,贮于棕色瓶避光保存;
乙酸盐溶液
70g氯化钾和40g硫酸锌溶于水中,加入200mL冰乙酸,再用水稀释至1000mL;
10%碘化钾溶液;
1%淀粉溶液;

(含5个结晶水) 000mL水中,贮于棕色瓶避光保存,一星期后标定其浓度;
酸洗石英砂。

玻璃试管:φ25×220mm;
量筒:50mL;25mL;
恒温水浴:可控温30±℃;
秒表;
加液器或移液管:2mL;10mL;
移液管:5mL;
玻璃漏斗及中速滤纸;
电炉;
锥形瓶:100mL;
滴定管:10mL;
天平:;;
pH计或精密pH试纸:±。


%,淀粉含量为68%~72%,±。如果淀粉含量过高或过低时,则称样量应按式(1)计算:
称样量(g)=………………………(1)
式中:P--100g试样中蛋白质的克数(含氮量×);
M--100g试样中水分的克数。

,加入1小勺酸洗石英砂,混匀并将试样摇松倾斜于试管底部,准确量取46mL已预热至30℃的α-淀粉酶液,先将少许α-淀粉酶液加入试样中并尽量摇匀,立即计时,再加入其余α-淀粉酶液,加盖试管并上下颠倒摇动约30次使试样均匀悬浮。迅速将试管浸入30℃水浴中,然后每隔10min取出试管,上下颠倒摇动10次使试样重新均匀悬浮,恒温酶解刚好60min时,取出试管,立即加入2mL 10%硫酸溶液,充分混匀后,再加入2mL 12%钨酸钠溶液,摇匀并放置约2min后,用中速滤纸过滤。舍去最初几滴,收集滤液于干净锥形瓶中,此滤液即为试样测定液。
另取一支试管不加小麦粉试样,同时同上操作,所得滤液即为空白对照液。

准确吸取5mL试样液于试管中,再准确加入