白藜芦醇和紫杉醇抑制裸小鼠肝癌与SMMC7721细胞增殖作用及相关机制分析.pdf

复旦大学
硕士学位论文
白藜芦醇和紫杉醇抑制裸小鼠肝癌与SMMC-7721细胞增殖作用及
相关机制研究
姓名:王立权
申请学位级别:硕士
专业:动物学
指导教师:许兰文
20040516
白葬芦醇和紫杉醉抑制裸小鼠肝癌与细胞
增殖作用及相关机制研究
中文摘要
肝细胞癌简称肝癌是最常见和恶性程度最高的肿瘤之一,位居全球恶性肿
瘤发病率的第位,在我国为恶性肿瘤死因第位。采用天然化学防癌剂来观察其
抗肿瘤作用以及探讨它们可能的抗癌机制是近年研究热点,具有广阔的应用前景。
白妻芦醇,简称是一类主要存在于葡萄、菠芦、虎杖等植物中的
经基二苯乙烯类化合物,具有多种生物学效应。最新研究结果指出具有拮抗肿
瘤的作用,但其抗癌的作用机制尚不清楚。紫杉醇是从紫衫树皮中分
离得到的天然产物,是一种具有独特结构和独特作用机制的抗肿瘤药物。研究发现
紫杉醇可抑制微管动力学,干扰有丝分裂纺锤体的装配,使染色体分离失败紫杉
醇还能诱导细胞凋亡和通过激活巨噬细胞调节机体免疫功能。在本研究中采用白蓉
芦醇和紫杉醇来观察它们对荷肝癌裸小鼠肿瘤和人肝癌细胞增殖的抑
制作用并对可能的作用机制做初步探讨。
目的研究白黎芦醇和紫杉醇对荷肝癌裸小鼠肿瘤和人肝癌细胞增殖
的抑制作用,观察白葬芦醇和紫杉醇能否影响诱导细胞凋亡或参与信号传导通路相
关基因及蛋白的表达变化,从体内和体外两方面来研究白罄芦醇和紫衫醇的抗肝癌
效果和可能的作用机制二方法建立荷人肝癌细胞裸小鼠肿瘤模型观
察白薄芦醇和紫杉醇对肝癌的抑制作用采用不同浓度的白葵芦醇处理荷肝癌裸小
鼠,从肿瘤重量、体积以及组织病理学来观察白要芦醇对肝癌的抑制作用采用
方法观察白葬芦醇对肝癌组织内咬基因表达变化
的影响采用法观察白羹芦醇和紫杉醉对细胞增殖的抑制作用
采用流式细胞仪和荧光显微镜从生化和形态两方面观察白薄芦醇可否诱导
细胞凋亡采用方法检测白葵芦醇对人肝癌细
胞内和基因表达变化的影响采用
杂交方法检测白要芦醇对人肝癌细胞内和连环蛋白表
达变化的影响在肿瘤发展的不同阶段采用紫杉醇处理荷肝癌裸小鼠,从肿瘤重量
和组织病理学检查来观察紫杉醇对肝癌的抑制作用采用方法观察紫杉醇
对人肝癌细胞内和基因表达的影响。结
果白黎芦醇可以明显抑制荷肝癌裸小鼠肿瘤和人肝癌细胞的增殖
方法检测表明白黎芦醇可使不同组别肝癌组织和细胞中
基因表达降低,基因表达升高,基因表达降低,在肝癌组织中
基因表达升高,而在细胞中咬基因表达无明显变化,基因表
达降低采用流式细胞仪和荧光显微镜进行观察,从生化和形态两方面证实了白黎
芦醇可以诱导细胞凋亡随后采用白纂芦醇以不同浓度及不同时间处
理细胞,方法检测表明细胞内和的蛋白
含量均有下降,并且有浓度和时间依赖性在实验中观察到紫杉醇也可以明显抑制
荷肝癌裸小鼠肿瘤和细胞的增殖采用不同浓度的紫衫醇处理
细胞,检测表明细胞内基因表达升高,和
基因表达降低,基因表达升高组织病理学检查表明白要芦醇和紫杉醇处理组
肝癌组织切片中可发现出血、坏死和纤维化等现象。结论白葬芦醇和紫杉醇对荷
肝癌裸小鼠肿瘤和人肝癌细胞增殖具有明显的抑制作用,其机制很可
能是通过调节那些与细胞增殖和细胞凋亡相关的信号通路中的关键元素来发挥抗肝
癌作用。
关键词肝癌白葬芦醇紫杉醇裸小鼠连环蛋白
细胞
,






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工



















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、
,
第一部分白葬芦醇对荷肝癌裸小鼠肿瘤抑制作用的实验研究
前言
肝细胞癌〔简称肝癌是最常见和恶性程度最高的肿瘤之一,位居全球恶性肿
瘤发病率的第位,死亡率极高,在我国为恶性肿瘤死因第位,我国每年死于肝
癌约万人,占全世界肝癌死亡人数的,由于它生存期短,病情发展迅速,病
死率极高,严重危害人类生命健康,素有“癌中之王”之称。对其如何有效地预防、
早期诊断以及治疗现己成为医学研究的重点。
近年来,采用天然化学防癌剂来观察其抗肿瘤作用以及探讨它们可能的抗癌机
制是研究热点,具有广阔的应用前景。白葬芦醇简称,化学名
称为’一三羚基苯二烯,化学结构如下

是一类主要存在于葡萄、琴芦、虎杖等植物中的经基二苯乙烯类化合物,现已
经在种植物中发现它具有多种生物学效应,包括抗炎症作用、保护神经作用、
保护心血管作用、植物雌激素作用以及影响骨代谢等作用。目前很多学者认为
是红葡萄酒中发挥生物学作用的主要功能因子,并且在体外能够和雌激素受体竞争
性结合,故此许多学者把它视为一种