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国际呼吸杂志年第卷第期,,,至·
肺鳞癌细胞信号转导及免疫相关基因表达谱分析
白澎张沪生王毓洲
【摘要】目的利用基因表达谱芯片技术寻找人类肺鳞腐组织和正常肺组织中与生物信号转导或免
疫反应有关的差异表达基因。方法分别提取肺鳞癌和正常肺组织总后,逆转录合成探针,
混合后与一型基因芯片杂交,氏扫描仪扫描杂交信号,计算机分析差异表达基因。
结果筛选出在组以上标本中存在差异表达的基因条,其中条表达上调, 条表达下调
。。结论利用基因芯片技术实现了高通量筛选与肺癌发生发展密切相关的基因,发现了”条在
肺鳞庙中与细胞信号转导或免疫反应有关的差异表达基因,为今后更深人的研究指明了方向
【关键词】微矩阵基因芯片肺肿瘤免疫生物信号转导
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肺癌是目前全球范围内最常见的恶性种瘤之基因芯片由上海博星基因芯片有限责任公司提供
一,其发病率和病死率呈不断上升的趋势。研究表该表达谱芯片上共有个点,这个靶基因
明,在肺癌的发生发展过程中必然有细胞间或细胞在中均可检索到,表达产物的功能均与细胞
内生物信号转导、体液免疫反应及细胞免疫反应的信号转导及免疫反应有关。
参与。本研究利用新近兴起的基因芯片技术,将与组织材料
生物信号转导及免疫反应有关的条基因制成实验组经病理证实的例肺鳞状细胞癌
微矩阵一型基因芯片,通过此微矩新鲜标本,均来源于肺鳞状细胞癌患者手术切除标
阵筛选肺癌组织与正常肺组织的差异表达基因,寻本,生例患者均为男性,年龄一岁,既往均有长
找出与肺癌的生物信号转导及肿瘤免疫有关的基期大量吸烟史,吸烟指数支年,其中期及
因,为今后通过干预生物信号转导来抑制肺癌的发期患者各例。
生发展,以及肺癌的免疫治疗等研究提供依据。对照组上述例患者手术切除标本中的
材料与方法肺正常组织标本例,所切取正常肺组织边缘与肉
芯片型号及说明本研究所用一型眼所见肺癌组织之间距离。,经病理检查证实
未见肿瘤细胞及癌前病变。
作者单位‘。。首都医科大学附属北京同仁医院呼吸内科总提取应用试剂盒提取组织
白澎、张沪生,。。。北京协和医院肿瘤科王毓洲总‘ 为原料,在逆转录酶催化下,逆转录总验各组归一化系数均在与之间,对照组及实
中的,用一标记正常肺组织验组扫描图的平均信号强度与平均背景的比值均不
,用一标记肺鳞癌组织,合小于,符合表达谱芯片实验成功标准。基因显著
并实验组和对照组后,用纯化柱纯化逆转录性差异表达的判定标准为①。或
所得的。二②在组以上标本中均存
杂交将已制备的探针置于℃水浴中变性在差异表达,且差异表达的方向一致均上调或均
,芯片置于℃水浴中变性,将探针置于下调。
芯片上,用盖玻片覆盖,置于杂交舱中,密封后放人结果
℃杂交箱内杂交。用洗涤试剂冲洗玻基因芯片筛选结果本实验发现在组以