菌落总数检测.doc

菌落总数检测
菌落总数测定
1. 原理:
菌落总数是指食品检样经过处理,在一定条件下培养后(如培养基成分,培养温度和时间,PH,需氧性质等),所得1ml (g) 检样中所含菌落的总数。本方法规定的培养条件下所得结果,只包括一群在培养琼脂上生长的嗜中温性需氧的菌落总数。菌落总数主要作为判定食品被污染程度的标志,也可以应用这一方法观察细菌在食品中繁殖的动态,以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。
2. 仪器设备与器具:
参照大肠菌群的检测方法
3. 试剂:
:
,摇动均匀。
,牛皮纸包封瓶口。
,以121℃15分钟灭菌。
(约45℃)备用。
:参照大肠杆菌群测定标准
4. 测定方法:
:
(g)放于含有225ml灭菌生理盐水或其
他稀释的灭菌玻璃瓶内(瓶内预置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振摇或研磨作成1:10的均匀稀释液。
:10稀释液1ml,注入含有9ml灭菌生
理盐水或其它稀释液的试管理体制内,用定量移液器在试管内鼓励气三至四次使其混合均匀,作成1:100的稀释液。
,按上述操作依次作10售递增稀释液,
每递增一次,换用一支1ml灭菌吸管。
,选取二
至三个适宜稀释度,分别在做10倍数递增的同时,即以吸取该稀释度的吸管移1ml稀释液于灭菌平皿内,每个稀释度做二个平皿。
,稀释度等。
,注入冷却到46℃营养琼脂约15ml,水
平徐徐振振摇,使培养基检液混合均匀后,同时将营养琼脂培养基倾入加有1ml稀释液的灭菌平皿内作空白对照。
,翻转平板,置36±1℃培养箱中培养48±
2hr。
:做工平板菌落计数时,可用肉眼观查,必要
时用放大镜检查,以防遗漏。在记下各平板的菌落数后,求出同稀释度的各平板平均菌落总数。
:
:选取菌落数在此30至300之间的平板作
为菌落总数测定标准。一个稀释度使用两个平板,采用两面三刀个平
板平均娄和,其中一个平板有较大片状菌落生长时,则
不宜采用,而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数,若片面性状落不到平板的一半,而其中一半中菌落分布以很均匀,即可计算半个平板后乘2以代表全皿菌落数。平皿内如有链状菌落生长时(菌落之无明显界线),若只有一条链,可作为一个菌落;如果有不同来源的几条链,则应将每条链作为一个菌落计。
:
(1) 应选择平均菌落数在30至300之间的稀释度,乘以稀释倍数
报告之。
(2) 若有两面三刀个稀释度,其生长的菌落均在30至300之间,
则视两者之比如何来决定,基其比值小于或等于2,应报告其平均数;若大于2,应报告其平均数;若大于2则