辽宁师范大学硕士研究生学位论文灵芝硒多糖构效关系的比较研究论文题目:研究生:温磊指导教师:尚德静教授学科专业:细胞生物学年级:级辽宁师范大学研究生部年
灵芝硒多糖构效关系的比较研究研究生:尚德静教授温磊指导教师:学科专业:细胞生物学本论文通过食用菌深层发酵方法,向灵芝发酵菌丝体发酵液中加入了无机硒一摘要多糖和硒对许多疾病都有防治作用,近年来对多糖和硒的活性的研究已经较为深入,但将多糖与硒有机结合成为硒多糖,在国内外的研究尚处于起步阶段。灵芝硒多糖是一种通过生物转化作用得到的半天然、半人工合成的富硒真菌多糖,硒多糖的化学结构有别于普通多糖,形成了特殊的硒氧键;硒多糖具有多种生理活性,具有可拮抗重金属中毒和抗活性氧损伤的能力,从而发挥其抗氧化作用;影响细胞周期,使癌细胞铣墒茏瓒种瓢┫赴ぃ徊⒛芄挥盏贾琢鱿赴蛲龉的发生等。亚硒酸钠,经深层发酵后,有效的将无机硒转化成有机硒并富集于灵芝菌丝体中,热水、碱水浸提得到灵芝硒多糖粗提物。后经去蛋白、脱色、.析、高效液相色谱柱层析等步骤,将灵芝租多糖纯化为种组分,笛楸砻鳎多糖组分对癌细胞抑制率最高。本论文的着重点是通过对纯化的各多糖组分化学结构的比较,通过分析不同生物活性多糖物质在其化学结构上的差异,从而从化学结构比较的角度为硒多糖的高效生物活性找到证据。本实验的研究对象是富硒多糖、和不富硒的灵芝多糖—.,利用红外光谱、紫外光谱、气相色谱、质谱和核磁共振等仪器同步进行结构分析,以求阐明它们在结构上的差异。高效液相色谱法测定了硒多糖..蚐的分子量分别为红外光谱分析表明硒多糖中的元素可能是以键或猳—键的形式存在。灵芝多糖糖环上的某些部位甲基化具有普遍性,而硒多糖的糖环上的这种甲基化不明显。紫外光谱扫描结果显示硒多糖在和两处均无明显吸收,说明纯化后的硒多糖已不含核酸和蛋白质。.。
,琑四种单糖,摩尔比分别为:::和:::;,琗,琑五种单糖,摩尔比分别为::甲基化单糖的质谱解析和核磁共振的峰谱指派分析综合看来,中的糖苷键有虰—四种类型;中的糖苷键有琿琣恫,猉母—和瓽—六种类型:.械奶擒占衝—,—,—《珺,蚎—七种类型;中的糖苷键有Ⅱ蛞籊珺琩—,—·Ⅱ·—,—和八种类型。综合红外光谱图中给出的氧族元素与碳原子结合的振动蜂特征看来,:灵芝硒多糖分离纯化结构分析构效关系灵芝硒多糖构效关系的比较研究::和::::。
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前言垦苎堡垒塑塑墼羞墨盟墼堕塞比无机硒显著‘俊㈣,因此,将无机硒与多糖物质有机结合并使之转化为有机硒化合的病理过程。使得人体对这些疾病的免疫力大大提高。然而纵观当前该领域内的研灵芝俏夜揭┍庵械囊恢终涔蟮囊┦沉接镁A橹ブ的化学物质多样,成分复杂,其中的灵芝多糖是灵芝研究最深入最广泛的一类化合物,是提高人体免疫功能,具有扶正同本的主要有效成分,其许多功能被应用于功能性食品和临床治疗。灵芝多糖存在于菌丝体、子实体及其发酵液中,是由个以上的单糖以糖苷键连接而成的高分子多聚物,经现代药理学和临床研究证明灵芝多糖,具有增强机体免疫力、抗自由基、延缓衰老等作用【【“。硒是人体必需的微量元素,对人类健康有着重要意义。研究证明,硒可以阻抗自由基,对于人体延缓衰老有重要意义,同时硒与多种疾病如心血管系统疾病、癌症、糖尿病、腥镜让芮邢喙亍N肷锎蠓钟杞岷希硐殖龆栽銮炕免疫力和临床疾病显著的治疗效果。然而,。揭示活性多糖的化学结构特别是硒元素与多糖的连接方式无疑将会为从分子生物学的角度阐明硒多糖的作用机制提供重要信息然而无机硒具有蓄积性毒性和致突变作用,使用时剂量难以控制的缺点,而有机硒的毒性低。副作用小,不但能够更好的发挥硒的作用,而且在激发免疫反应上物——硒多糖,使得硒和多糖二者的生理和药理功能得到相互优化和补充。目前富硒多糖的化学结构与其生物活性的关系已成研究热点,有证据表明硒可能是以为基团与糖环上相邻的两个羟基形成共价键,从而改变了多糖的天然构象,使之容易通过与细胞表诬的多糖受体相识别而起到细胞免疫应答的效果。另外尚存在一些观点认为改变了构象的富硒多糖占据了细胞表面的某些特异识别位点,阻断了相关究成果,尚不存在令人信服的证据能够阐明硒多糖的结构变化是如何对其功能产生作用的,本论文的着眼点在于通过分析灵芝多糖和富硒灵芝多糖的化学结构的差异,试暾业接跋炱渖锘钚缘幕Ы峁股系囊恍┨
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