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尿液结核分枝杆菌检测对肾结核的诊断价值
[摘要] 目的探讨尿液结核分枝杆菌检测在肾结核诊断中的应用价值。方法对54例已确诊为肾结核的患者尿液标本分别采取抗酸菌涂片染色、改良罗氏培养、荧光定量PCR三种方法进行检测,其结果进行分析。结果抗酸菌涂片染色、改良罗氏培养、%、%、%。结论尿液结核分枝杆菌检测属病原学检测,特异性好、操作简便,对肾结核的诊断有着重要的应用价值。
[关键词] 尿液; 结核分枝杆菌; 肾结核; 诊断
[中图分类号] [文献标识码] A [文章编号] 1005-0515(2011)-12-362-01
结核病是目前严重威胁人类健康的重大传染性疾病之一[1]。近年来,随着结核病发病率在全球范围内的回升,肾结核的发病率也明显增加。据统计,全球每年有近千万人感染结核病,而肾结核约占其中的8%-20%[2]。该病进展隐蔽,发现时,肾功能已部分或完全丧失,患者早期诊断困难,以致延误治疗,对人们的身体健康危害极大。因此早诊断对治疗尤为重要。在众多辅助检查中,除病理诊断外,实验室病原学检查具有较高的特异性,且操作简便,患者无痛苦。现就最常用的抗酸菌涂片染色、改良罗氏培养、荧光定量
PCR三种检测方法进行分析,评价其在尿液结核分枝杆菌检测对肾结核诊断的应用价值。
1 材料与方法
标本来源 2006年11月至2009年10月我院住院的肾结核患者,共计54例。男性29例,女性25例。其中小于20岁者5例,大于40岁者12例,20-40岁者37例,%;单侧肾结核48例,双侧肾结核6例;合并其他脏器结核病(如肺结核、脊柱结核、肠结核、附睾结核等)39例,%。
标本收集抗酸菌涂片染色检测:留取12小时尿液,静置,倾去上清液,留取沉淀部分30ml,以3,000rpm离心30分钟,弃上清,取沉淀物涂片。
改良罗氏培养和荧光定量PCR检测:嘱患者留取晨尿,因晨尿浓缩,适用于做病原学检查。在留取尿液之前先用消毒液清洗外阴,以去除污染菌。分别留取中段尿约20ml-30ml于一次性无菌塑料标本杯中各一杯。为提高检出率,所有患者均连续留取3天标本,置于2℃-8℃冰箱中贮存,于3天后将尿液混合进行改良罗氏培养和荧光定量
PCR检测。
如患者正在进行抗结核药物治疗时,应停用所有抗结核药一周,以提高结核杆菌的检出率。
试剂与仪器
抗酸菌涂片染色试剂按照《全国临床检验操作规程》(第三版)(796)标准自行配置。无需特殊仪器。
改良罗氏培养试剂罗氏培养基由珠海贝索生物技术有限公司提供。仪器隔水式培养箱由天津市泰斯特仪器有限公司提供。
荧光定量PCR 试剂荧光定量PCR检测试剂由中山大学达安基因股份有限公司提供。。
方法
抗酸菌涂片染色按照《全国临床检验操作规程》(第三版)(795-796)标准执行操作。
改良罗氏培养将标本进行离心,以每分钟2000rpm离心3分钟为宜,-,以无菌操作接种于培养基斜面上,一