畜禽血常规检验1-1204.ppt

畜禽血常规检验(一)
临床兽医学教研室内诊组
2012年4月
内容
实验目的与要求
1
血样的采取与抗凝
2
血细胞计数检查
3
目的与要求
掌握动物血样的采取与抗凝方法。
掌握血红蛋白测定、红细胞及白细胞计数的操作方法与注意事项。
一、血样的采取与抗凝
1、血样的采取
①采血前的准备:采血用应事先消毒灭菌、干燥处理。采血部位应剪毛按常规消毒。
②少量用血,一般可在耳尖、冠顶及静脉末梢等处进行采取。
③多量用血,大动物可在颈静脉处进行采取;猪可在前腔静脉处采取;禽类在翅内静脉处采取,必要时可进行心脏穿刺采取。小动物一般采用心脏采血。
各种动物的采血部位
采血部位
畜种
采血部位
畜种
颈静脉
马、牛、羊
耳静脉
猪、羊、犬、猫、
实验动物
前腔静脉
猪
翼下肱静脉
家禽
隐静脉
犬、猫、羊
蹼间静脉
鸭、鹅
前肢头静脉
犬、猫、猪
冠或肉髯
鸡
心脏
兔、家禽、豚鼠
断尾
猪、实验动物
2、血样的抗凝
兽医临床常用的抗凝剂、使用方法及用图,见下表。
抗凝剂
抗凝机制
常用浓度
使用方法
用途
肝素
阻止凝血酶元转化为凝血酶而阻止血凝
~1%溶液
配制后应及时使用,~。
适用于多数血液实验诊断检验,不宜用于血涂片检查。
柠檬酸钠
(枸橼酸钠)
与钙离子形成非离子的可溶性化合物而阻止血凝
%溶液
每10ml血液加入1ml。
适用于红细胞沉降率、输
血用抗凝,但不宜用于血
液生化指标测定。
EDTA-Na2
螯合血中钙离子而阻止血凝
10%溶液
~。
适用与一般血液学检查,不宜用于钠、钙的测定。
草酸盐合剂
(草酸铵+草酸钾)
与钙离子结合,形成不溶解的草酸钙而阻止血凝
1~2%的草酸
盐溶液
取此液先作抗凝瓶。
1ml此液可抗凝10ml血样(制作抗凝瓶应小于80℃)。
有毒不能用于输血的抗凝,不宜用于白细胞分类计数与血小板计数。
肝素
血液学检查项目与采血后可保存的时间
检查项目
保存时间(h)
检查项目
保存时间(h)
白细胞计数
2~3
血红蛋白含量
48
红细胞计数
24
红细胞压积容量
24
血小板计数
1
红细胞沉降速率
2~3
网织红细胞计数
2~3
白细胞分类计数
1~2
二、红细胞计数(RBC) :显微镜计数法
1、原理
血液经200倍稀释后,充入血细胞计数板,用显微镜观察,计数一定容积内的红细胞数并换算成每升血液中的红细胞数。
2、器材与试剂
改良纽巴氏计数板、盖玻片、沙利氏吸管、5ml吸管、试管、小玻棒、显微镜、计数器、%氯化钠稀释液。
3、方法
①用5毫升吸管准确吸稀释液2毫升于试管中,用沙利氏吸管吸取血样10微升,用脱脂棉擦去沙利氏吸管外壁多余的血液后插入试管底部,轻轻压出血液于稀释液中,再用上清液吸、吹数次,以洗出沙利氏管内黏附的血细胞,充分混匀后备用。
②将稀释后的血样用小玻棒取一滴,置于计数板与盖玻片交界的边缘,让其自然浸入,使稀释血样扩散入计数室内,静置2~3分钟,镜检。
③计数时用低倍镜,依次计数中央大方格内的四角和正中5个中方格,共80个小方格的红细胞数。为避免重复和遗漏,计数时应按一定顺序进行。注意压在双线上的红细胞,遵守“数左不数右,数上不数下”计数法则。