实验室常用缓冲液配置方法.doc

实验室常用缓冲液配置方法
1)1 M Tris-HCl (, , )
组份浓度:1 M Tris-HCl
配制量:1 L
配制方法:
1. g Tris置于1 L烧杯中。
2. 加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。
PH值
浓HCl

约70ml

约60ml

约42ml
4. 将溶液定容至1 L。
5. 高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,。
2)10×TE Buffer (, , )
组份浓度:100 mM Tris-HCl, 10 mM EDTA
配制量:1 L
配制方法:
1. 量取下列溶液,置于1 L烧杯中。
1M Tris-HCl Buffer(,,)
100ml
500mM EDTA()
20ml
2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水,均匀混合。
3. 将溶液定容至1 L后,高温高压灭菌。
4. 室温保存。
3) M Tris-HCl ()
组份浓度: M Tris-HCl
配制量:1 L
配制方法:
1. g Tris置于1 L烧杯中。
2. 加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 。
4. 将溶液定容至1 L。
5. 高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,。
4)3 M 醋酸钠()
组份浓度:3M 醋酸钠
配制量:100ml
配制方法:
1.
NaAc·3H2O置于100-200ml烧杯中,加入月40ml的去离子水搅拌溶解


4高温高压灭菌后,室温保存。
5)PBS Buffer
组份浓度:137 mM NaCl, mM KCl, 10 mM Na2HPO4, 2 mM KH2PO4
配制量:1 L
配制方法:
1. 称量下列试剂,置于1 L烧杯中。
NaCl
8g
KCl

Na2HPO4

KH2PO4

2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。
3. ,然后加入去离子水将溶液定容至1 L。
4. 高温高压灭菌后,室温保存。
注意:上述PBS Buffer中无二价阳离子,如需要,可在配方中补充1 mM mM MgCl2。
6)10 M 醋酸铵
组份浓度:10 M 醋酸铵
配制量:100 ml
配制方法:
1. g醋酸铵置于100~200 ml烧杯中,加入约30 ml的去离子水搅拌溶解。
2. 加去离子水将溶液定容至100 ml。
3. mm滤膜过滤除菌。
4. 密封瓶口于室温保存。
注意:醋酸铵受热易分解,所以不能高温高压灭菌。
7)苯酚/氯仿/异戊醇(25 : 24 : 1)
配制方法:
1. 说明:从核酸样品中除去蛋白质时常常使用苯酚/氯仿/异戊醇(25 : 24 : 1)。氯仿可使蛋白质变性并有助于液相与有机相的分离,而异戊醇则有助于消除抽提过程中出现的气泡。
2. 配制方法:将Tris-HCl平衡苯酚与等体积的氯仿/异戊醇(24 : 1)混合均匀后,移入棕色玻璃瓶中4℃保存。
8)10% (W/V) SDS
组份浓度:10% (W/V)SDS
配制量:100ml
配制方法:
-200ml烧杯中,加入约80ml的去离子水,68℃加入溶解
2.

,室温保存。
9)2 N NaOH
组份浓度:2 N NaOH
配制量:100 ml
配制方法:
1. 量取80 ml去离子水置于100~200 ml塑料烧杯中(NaOH溶解过程中大量放热,有可能使玻璃烧杯炸裂)。
2. 称取8 g NaOH小心地逐渐加入到烧杯中,边加边搅拌。
3. 待NaOH完全溶解后,用去离子水将溶液体积定容至100 ml。
4. 将溶液转移至塑料容器中后,室温保存。
10)2