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酸性磷酸酶染色液使用说明

产品简介:
酸性磷酸酶(Acidphosphatase,ACP)分布极广泛,遍布各种组织,主要存在于细胞的溶酶体内,所以常作为溶酶体标志酶。溶酶体外的酸性磷酸酶存在于内质网和胞质内。各种动物中的酸性磷酸酶各有不同,-。
酸性磷酸酶染色液以β-甘油磷酸钠为底物,在酸性pH下被酸性磷酸酶水解释放出磷酸盐,遇到铅离子则生成磷酸铅沉淀,再被S2+置换,最终生成硫化铅棕黑色沉淀。酸性磷酸酶的一般抑制剂为氟化物、磷酸根离子。对某些酸性磷酸酶来讲,Cu2+、酒石酸根离子和四氯化碳以及醛类也都是抑制剂,Mn2+为该酶的激活剂。冰冻切片和石蜡切片均可,但多用冰冻切片。临床上,改染色法对前列腺癌和其他脏器的转移性前列腺癌呈强阳性反应,霍奇金淋巴瘤、胃癌、肺癌、乳腺癌、舌表皮性癌、多核巨细胞瘤的瘤细胞质也呈强阳性反应,Ewing肉瘤、成骨肉瘤等呈阴性反应。
产品组成:规格
名称
试剂(A):ACP孵育液
试剂(B):ACP硫化液
试剂(C):ACP对照液
使用说明书
自备材料:
蒸馏水、恒温箱、封片剂
操作步骤(仅供参考):
(一)冰冻切片染色G14902×50ml50ml2×1ml10ml1份Storage4℃避光RT避光4℃避光

1、冰冻切片至蒸馏水。
2、切片入ACP孵育液,置于37℃温箱,浸染15-60min。
3、入37℃蒸馏水中洗2次,每次1min,以去除未被吸附的铅。
4、在上述过程中配制ALP硫化工作液,即取试剂(B)用蒸馏水稀释50倍,即为ALP硫化工作液,即配即用。切片入硫化工作液,孵育1-2min。
5、流水冲洗3-5min,蒸馏水洗。
6、(可选)核固红复染细胞核,蒸馏水洗。
7、甘油明胶封片。
(二)石蜡切片染色
1、石蜡切片脱蜡至蒸馏水。
2、切片入ACP孵育液,置于37℃温箱,浸染4-12h,可以延长至24h。
3、入37℃蒸馏水中洗2次,每次1min,以去除未被吸附的铅。
4、在上述过程中配制ALP硫化工作液,即取试剂(B)用蒸馏水稀释
50倍,即为ALP硫化工作液,即配即用。切片入硫化工作液,孵育1-