神经退行性疾病相关蛋白的翻译后修饰对蛋白功能影响的探究.pdf

中国科学技术大学
博士学位论文
神经退行性疾病相关蛋白的翻译后修饰对蛋白功能影响的研究
姓名:费尔康
申请学位级别:博士
专业:神经生物学
指导教师:王光辉
20080101
码谷氨酰胺的密码子��氖�吭诮牛��蛑蟹钦�@┰龆��鸬囊恢殖H�摘要色体显性遗传的多聚谷氨酰胺病。该病的主要病理特征为突变的���.�肱肋,本论文主要从家族型肌萎缩侧索硬化症���的致病蛋白��的��我们运用免疫共沉淀方法和体外��化反应,发现��能够被��.�这个保守的��修饰位点突变为精氨酸后,��则完全不能够被神经退行性疾病是一类由脑中特定区域神经元发生退变而引起的慢性进行性神经系统疾病,通常可分为家族遗传型和散发型,在家族遗传型中,主要由于致病基因的突变而引起发病。大部分神经退行性疾病的一个共同的病理特征是致病蛋白会由于降解异常而在胞质、胞核或者胞外形成异常的积聚而形成聚集。约有�%的家族遗传型肌肉萎缩侧索硬化症������的基因发生突变而引起的,从而造成脑和脊髓运动神经元的选择性丧失引起发病。突变的��通常在发病患者的脑和脊髓中通过聚集而形成包涵体,但其致病机制以及突变蛋白的聚集机制至今尚未能明确阐述。另一种神经退行性疾病脊髓小脑共济失调�������聿槎啵�忌7虿���是由于编编码蛋白�诨颊咭赘心郧�诘纳窬�0�四诰奂�纬砂��澹��渚奂��埔�及致病机制至今也不清楚。神经退行性疾病中聚集的形成与这些致病蛋白的翻译后修饰作用有很大的关系。蛋白质的翻译后修饰包括磷酸化、乙酰化、甲基化、泛素化和��化等,它们可以通过调节底物蛋白的活性、亚细胞器定位、稳定性或者与其它蛋白质的相互作用而达到调节蛋白功能的作用。很多神经退行性疾病相关蛋白如�����、���.��.��������和��扔捎赟���奘味�缘鞍坠�能以及疾病发病过程产生影响,也有很多研究表明多聚谷氨酰胺疾病蛋白如�����,���.�虳��的磷酸化对于蛋白的功能以及疾病发生有很重要的影响。因此,蛋白质的翻译后修饰作用与神经退行性疾病之间存在着很大的联系。化和脊髓小脑共济失调�������聿槎嘁辉忌7虿���致病蛋白���.�的磷酸化这两方面来探讨蛋白质翻译后修饰对这些神经退行性疾病致病蛋白特性的影响,主要研究结果如下:修饰,但是却不能被��.�蚐���修饰。将��中第�位赖氨酸��.�奘巍Mü��徊降南赴�沧H炯际酰�⒂糜ü庀晕⒕倒鄄旆⑾志���
结合,荠显遴过警。��ü�赐�进行体外磷酸纯实验证骧琵常秘扩震的戡��.��鼙患っ窯��磷酸化。通过磷酸化位点的点突变实验,我们发现磷酸化的位点是在���一�牡��位丝氨酸上。我们迸一步构建了第��缨脆转染和免疫翠迹检测发现,扩震翡舔���鲍���槐涮寤嵊捌菽璺�透过以上两个方覆翁研究结果爵竣看毒,蛋自质蕊译后修饰作蔫能够调节神关键词:享孛经逯行褴疾病蛋鑫质翻泽詹修饰家族型瓿离萎缩侧索硬纯症钢锌�醚��修饰螽,野生型秘突变型��所形成翁憨浆蠹聚集均会增糯,而且��.�芄槐晦�贾罶���纬傻木奂�希�隨��谟О�诰奂��上有共定位现象。更进一步通过加入放线菌酮���砸种菩律�鞍椎暮�成来检测已合成蛋囱的降解速度,证实��.�梢晕榷ㄒ吧�秃屯槐湫��◇��徊焕蠼到狻U庑┙峁�崾荆琒��畕对��在第�德赖氨酸的修饰砸能参与调控��的稳定性以及聚集的形成,进丽可能对出��突变所引起的��的发病产生影响。我背�擞肎���.��和免疫共沉淀实验证实激酶���与����能够位丝氨酸丧失磷酸化的突变体���约澳D饬姿峄�耐槐涮錝��,采用子量的多聚体形成聚集,丽没有突变的扩展的����和其���槐涮逶�只是单体。更进一步与分子伴侣���騂��分别共转染后发现,���能够抑制扩展的采��.�腟��突变体形成聚集。这些结采表鞠激酶���对�鳌甶融���位丝氯酸的磷酸化能蟛调节鑫��珏�的聚集,该特性可能对��/��姆⒉〔��跋臁�经退行性疾病致病蛋叁的特性,影镌蛋自的聚集,从两可能对予疾病的发瘸产生影响。过氧化物歧化酶��仡脊髓小脑共济失调��停�聿槎啵�忌7蛉����.�绿窃�铣擅讣っ噶姿峄�摭要��
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