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FSPYL029 饮料志贺氏菌的检验平板观察法

F_SPYL029
饮料—志贺氏菌的检验—平板观察法

1 范围
本方法适用于饮料中志贺氏菌的检验。
2 原理
饮料样品处理后,经增菌、分离、生物学实验及血清学鉴定判定志贺氏菌型,报告结果。
3 试剂
GN增菌液
成分
胰蛋白胨 20g
葡萄糖 1g
甘露醇 2g
柠檬酸钠 5g
去氧胆酸钠
磷酸氢二钾 4g
磷酸二氢钾
氯化钠 5g
蒸馏水 1000mL
制法
按上述成分配好,加热使溶解,。分装每瓶225mL,115℃高压灭菌
15min。
HE 琼脂
成分
月示胨 12g
牛肉膏 3g
乳糖 12g
蔗糖 12g
水杨素 2g
胆盐 20g
氯化钠 5g
琼脂 18~20g
蒸馏水 1000mL
% 溴麝香草酚蓝溶液 16mL
Andrade 指示剂 20mL
甲液 20mL
乙液 20mL
制法
将前面七种成分溶解于 400mL 蒸馏水内作为基础液,将琼脂加入于 600mL 蒸馏水内,
加热溶解。加入甲液和乙液于基础液内,校正 。再加入指示剂,并与琼脂液合并,待
冷至 50~55℃,倾注平板。
注: ①此培养基不可高压灭菌。
②甲液的配制
硫代硫酸钠 34g
1
柠檬酸铁铵 4g
蒸馏水 100mL
③乙液的配制
去氧胆酸钠 10g
蒸馏水 100mL
④ Andrade 指示剂的配制
酸性复红
1mol/L 氢氧化钠溶液 16mL
蒸馏水 100mL
将复红溶解于蒸馏水中,加入氢氧化钠溶液。数小时后如复红褪色不全,再加氢氧化
钠溶液 1~ 2mL。
SS 琼脂
基础培养基
牛肉膏 5g
月示胨 5g
三号胆盐
琼脂 17g
蒸馏水 1000mL
将牛肉膏、月示胨和胆盐溶解于400mL蒸馏水中,将琼脂加入于600mL蒸馏水中,
煮沸使其溶解,再将两液混合,121℃高压灭菌15min,保存备用。
完全培养基
基础培养基 1000mL
乳糖 10g
柠檬酸钠
硫代硫酸钠
10%柠檬酸铁溶液 10mL
1%中性红溶液
%煌绿溶液
加热溶化基础培养基,按比例加入上述染料以外之各成分,充分混合均匀,
校正至 ,加入中性红和煌绿溶液,倾注平板。
注; ①制好的培养基宜当日使用, 或保存于冰箱内于 48h 内使用。
②煌绿溶液配好后应在 10d 以内使用。
③可以购用 SS 琼脂的干燥培养基。
麦康凯琼脂
成分
蛋白胨 17g
月示胨 3g
猪胆盐(或牛、羊胆盐) 5g
氯化钠 5g
琼脂 17g
蒸馏水 1000mL
乳糖 10g
% 结晶紫水溶液 10m