乙肝疫苗的制备 PPT课件.ppt

乙肝疫苗的制备_PPT课件基因工程
-乙肝疫苗的制备
演讲者: 鞠林
PPT 制作者:杨秀兰李翠华
欧永银
资料提供者:
鞠林
刘珍
王伟杰
彭博
周永斌
李凯
向运新
朱晓东
基因工程定义:又称为重组DNA技术,指将某些特定的基因或DNA片断,通过载体或其它手段送入受体细胞,使它们在受体细胞中增殖并表达的一种遗传学操作。是生产出符合人类需要的产品或创造出生物的新性状并能稳定遗传。作用:可把来自任何生物的基因转移到与其毫无关系的任何其他受体细胞中,可以任意改造生物的遗传特性,创造出生物的新性状。某一段DNA可在受体细胞内进行复制,为制备大量纯化的DNA片段提供了可能.
获得目的基因
表达载体
重组的表达载体
酶切、连接
宿主细胞
转化、转染等
原核生物细胞
植物细胞
动物细胞
卵细胞
培养的动物细胞
转基因动物
胚胎发育
药物、疫苗
转基因植物
转基因微生物
基因工程药物
人类细胞
基因治疗
蛋白质名称用途
促肾上腺皮质激素(adrenocorticotrophic hormone) 治疗风湿(rheumatic disease)
B细胞生长因子(B-cell growth factor) 治疗免疫系统功能失调
降钙素(calcitonin) 治疗软骨病(osteomalacia)
集落刺激因子(colony stimulating factor) 治疗血液病、肿瘤辅助治疗
绒毛膜促性腺激素(chorionic gonadotropin) 治疗不排卵症
内啡肽和脑啡肽(endorphine and enkephalin) 镇痛剂(analgesic agent)
上皮生长因子(epidermal growth factor) 促进伤口愈合
红细胞生成素(erythropoietin) 治疗贫血(anemia)
凝血因子Ⅷ(factor Ⅷ) 治疗血友病(hemophilia)
凝血因子Ⅸ(factor Ⅸ) 治疗血友病
生长激素(growth hormone) 促进生长
生长激素释放因子(growth hormone releasing factor) 促进生长
胰岛素(insulin) 治疗糖尿病(diabetes)
干扰素(interferon) 抗病毒抗肿瘤
白细胞介素(interleukin) 治疗癌症
基因重组乙肝疫苗
用基因重组技术把乙型肝炎病毒的表面抗原(HbsAg)基因片段插入酵母细胞或哺乳动物细胞的基因中,在体外培养增殖过程中组装或分泌出乙型肝炎表面抗原,然后把表面抗原收集起来提纯之后做成乙型肝炎疫苗。
目的基因的获取
编码乙型肝炎表面抗原的基因的获取

一般的目的基因的获取方法有:
反转录法
化学合成法
反转录—聚合酶链反应法
cDNA文库的建立?
cDNA文库的建立
工程菌的构建
CHO细胞的特点
①具有准确的转录后修饰功能,表达的糖基化药 物蛋白在分子结构、理化特性和生物学功能方面最接近于天然蛋白分子
②具有产物胞外分泌功 能,便于下游产物分离纯化;
③具有重组基因的高效 扩增和表达能力;
④具有贴壁生长特性,且有较高的 耐受剪切力和渗透压能力,可以进行悬浮培养,表达水平较高;
⑤CHO 细胞属于成纤维细胞(fibrob2last) ,很少分泌自身的内源蛋白,利于外源蛋白的后分离